Σας ευχαριστούμε που επισκεφτήκατε το Nature.com.Η έκδοση του προγράμματος περιήγησης που χρησιμοποιείτε έχει περιορισμένη υποστήριξη CSS.Για την καλύτερη εμπειρία, συνιστούμε να χρησιμοποιήσετε ένα ενημερωμένο πρόγραμμα περιήγησης (ή να απενεργοποιήσετε τη λειτουργία συμβατότητας στον Internet Explorer).Στο μεταξύ, για να διασφαλίσουμε τη συνεχή υποστήριξη, θα αποδώσουμε τον ιστότοπο χωρίς στυλ και JavaScript.
Η διαταραχή μετατραυματικού στρες (PTSD) χαρακτηρίζεται από διαταραχή στην ικανότητα εξουδετέρωσης των απαντήσεων φόβου σε συνθήματα που σχετίζονται με τραύμα.Μελέτες σε ανθρώπους και ζώα δείχνουν διαφορές στη συμμετοχή ορισμένων περιοχών του μετωπιαίου φλοιού ως βασικών μεσολαβητών που καθορίζουν την επιτυχία της καταστολής του φόβου, αλλά η αλληλεπίδραση των νευρικών κυκλωμάτων που καθορίζουν τη διαφορική συμμετοχή αυτών των περιοχών δεν είναι ξεκάθαρη.Για να κατανοήσουμε καλύτερα πώς οι μεμονωμένες διαφορές στην ανάκληση εξαφάνισης αντικατοπτρίζονται στις διαφορές στη δραστηριότητα του νευρωνικού κυκλώματος, επισημάναμε τις προβολές από τον υπομυχιακό φλοιό του αρουραίου (IL) με ανάδρομους ιχνηθέτες και συγκρίναμε τις νευρωνικές προβολές εντός και εκτός των νευρώνων προβολής IL.Αναλύσαμε αυτά τα δεδομένα, ομαδοποιώντας τα ανάλογα με το βαθμό διατήρησης της μνήμης που ξεθωριάζει σε αρουραίους.Βρήκαμε ότι σε κύτταρα που προβάλλουν IL, οι νευρώνες στον οπίσθιο παραθάλαμο εμφάνισαν αυξημένη δραστηριότητα σε αρουραίους, οι οποίοι εμφάνισαν καλή ανάκληση εξαφάνισης.Εκτός από τα κύτταρα που προβάλλουν IL, αυξημένη δραστηριότητα Fos παρατηρήθηκε σε επιλεγμένες περιοχές της κλειστής μοίρας του αρουραίου και του κοιλιακού ιππόκαμπου με καλή ανάλυση.Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι οι διαφορές στην ανάκληση εξαφάνισης σχετίζονται με συγκεκριμένα μοτίβα νευρικής δραστηριότητας εντός και εκτός των προβολών IL.
Η προετοιμασία του φόβου συμβαίνει όταν ένα ουδέτερο ερέθισμα συνδέεται με ένα αποτρεπτικό ερέθισμα χωρίς όρους (UCS), έτσι ώστε το αρχικά ουδέτερο ερέθισμα, τώρα το εξαρτημένο ερέθισμα (CS), προκαλεί μια εξαρτημένη απόκριση φόβου (CR) απουσία του UCS.Η αντιστροφή του εξαρτημένου φόβου προκλήθηκε από τη μείωση του CR σε CS λόγω της επανειλημμένης παρουσίασης του CS απουσία του UCS1.Προηγούμενη έρευνα έχει δείξει ότι η διαταραχή μετατραυματικού στρες (PTSD) σχετίζεται με την αδυναμία να θυμηθούμε την εξάλειψη των εξαρτημένων απαντήσεων φόβου2.Ο ακρογωνιαίος λίθος της γνωσιακής συμπεριφορικής θεραπείας για τη θεραπεία της διαταραχής μετατραυματικού στρες είναι η θεραπεία έκθεσης που βασίζεται στην εξάλειψη των μαθημένων απαντήσεων φόβου3,4.Επομένως, μελέτες μεμονωμένων διαφορών στον φόβο της εξαφάνισης τρωκτικών και στους υποκείμενους νευρικούς μηχανισμούς μπορεί να βοηθήσουν στην αποσαφήνιση των διαφορών στις ανθρώπινες αποκρίσεις στο τραύμα και στη θεραπεία της διαταραχής μετατραυματικού στρες.Παρά την πρόοδο στον εντοπισμό των νευρικών μηχανισμών που διακρίνουν τις επιτυχημένες από τις ανεπιτυχείς αναμνήσεις εξαφάνισης, πολλά μένουν να ανακαλυφθούν.
Τα μοντέλα τρωκτικών είναι χρήσιμα σε αυτή την εργασία επειδή υπάρχουν σημαντικές ατομικές διαφορές στην ανάμνηση της εξαφάνισης τρωκτικών7,8,9,10.Προηγούμενη εργασία που διερεύνησε τους νευρικούς μηχανισμούς της εξαφάνισης του φόβου σε επίπεδο πληθυσμού έδειξε ότι η ενεργοποίηση του υπέρφυτου φλοιού (IL) απαιτείται για την ανάκληση της εξαφάνισης (αναφ. 11, 12, 13, αλλά βλέπε 14), και ορισμένες μελέτες έχουν βρει μείωση σε δραστηριότητα τρωκτικών στο IL που παρουσιάζει κακή μνήμη σχετικά με την εξαφάνιση σε σύγκριση με τα τρωκτικά, τα οποία είναι πολύ φοβισμένα.Ωστόσο, οι μηχανισμοί με τους οποίους τα IL εμπλέκονται διαφορικά στη διευκόλυνση της εξάλειψης του φόβου στα τρωκτικά σε σύγκριση με εκείνα που παρουσιάζουν ασθενέστερη εξαφάνιση είναι ασαφείς.
Μια πιθανότητα είναι ότι οι διαφορές στη μνήμη εξάλειψης του φόβου μεταξύ των ατόμων είναι αποτέλεσμα διαφορικής ενεργοποίησης συγκεκριμένων προσαγωγών IL.Ανατομικές μελέτες18 έχουν δείξει ότι διάφορες φλοιώδεις και υποφλοιώδεις περιοχές του εγκεφάλου στέλνουν πυκνές προβολές στο IL, το οποίο με τη σειρά του στέλνει απαγωγές προβολές σε πολλές περιοχές του εγκεφάλου.Μελέτες σε επίπεδο πληθυσμού έχουν δείξει ότι οι προβολές IL στην αμυγδαλή είναι σημαντικές για την απόκτηση εξαφάνισης φόβου20,21,22 και η είσοδος IL από τη βασοπλάγια αμυγδαλή (BLA) σχετίζεται επίσης με τη μάθηση της εξαφάνισης.Υπάρχει λιγότερη έρευνα σχετικά με τη συμμετοχή των κυκλωμάτων με επίκεντρο την IL στην ανάκληση εξαφάνισης, αν και πρόσφατη εργασία υποδηλώνει ότι τόσο ο κοιλιακός όσο και ο ραχιαίος ιππόκαμπος εμπλέκονται στην πρόβλεψη της IL.Οι απαγωγές προβολές του IL στον ανασυνδυασμένο πυρήνα του θαλάμου, προφανώς, συμμετέχουν επίσης στη μνήμη της εξαφάνισης του φόβου.
Αυτές οι προηγούμενες μελέτες αρχίζουν να δίνουν μια εικόνα της αλληλεπίδρασης των νευρικών κυκλωμάτων που εμπλέκονται στην ανάκληση εξαφάνισης, αλλά υπάρχουν πολύ λίγα δεδομένα για το εάν η δραστηριότητα σε νευρωνικά κυκλώματα με επίκεντρο την IL επηρεάζει τις ατομικές διαφορές στην ανάκληση εξαφάνισης.Εδώ, προσπαθήσαμε να προσδιορίσουμε εάν οι διαφορές στη μνήμη εξάλειψης του φόβου μεταξύ των ατόμων σχετίζονται με αλλαγές στην ενεργοποίηση εισόδου IL σε συγκεκριμένες περιοχές του εγκεφάλου.Συγκεκριμένα, αξιολογήσαμε την ενεργοποίηση προσαγωγών κυττάρων IL στον παρακοιλιακό πυρήνα του θαλάμου (PVT), της κλείδας (CLA), του BLA και του κοιλιακού ιππόκαμπου (vHPC).Αυτές οι περιοχές του εγκεφάλου επιλέχθηκαν τόσο επειδή στέλνουν πυκνές προβολές στο IL όσο και επειδή υπάρχει λόγος να υποπτευόμαστε ότι μπορεί να εμπλέκονται στην έκφραση του φόβου για εξαφάνιση 18 .Για παράδειγμα, μια πρόσφατη μελέτη έδειξε ότι η PVT, μια περιοχή που είναι γνωστό ότι εμπλέκεται στην απόκτηση και την αναπαραγωγή φόβου, απαιτείται για την αναπαραγωγή της εξαφάνισης.Επιπλέον, προηγούμενες μελέτες έχουν δείξει αυξημένη βασική αμυγδαλή και δραστηριότητα vHPC σε αρουραίους που εκφράζουν μνήμη εξαφάνισης.Τέλος, η ανάλυση του claustrum είναι πιο διερευνητική δεδομένου ότι καμία από τις προηγούμενες εργασίες δεν έχει αξιολογήσει τον ρόλο του στην εξαφάνιση.Ωστόσο, πρόσφατη εργασία υποδηλώνει ότι παίζει ρόλο στη διαμόρφωση του φόβου με βάση τα συμφραζόμενα29.
Οι οπισθοδρομικοί ιχνηθέτες συζευγμένοι με ιούς GFP εγχύθηκαν στην IL των αρουραίων πριν από τη δοκιμή συμπεριφοράς και η δραστηριότητα Fos σε προσαγωγούς IL μετρήθηκε κατά την επανάληψη της εξαφάνισης, την ανάκληση φόβου και σε αρουραίους που δεν υποβλήθηκαν σε δοκιμασία συμπεριφοράς.Τα αποτελέσματά μας υποδεικνύουν ότι οι προβολές από τον οπίσθιο παρακοιλιακό θάλαμο προς την IL δείχνουν αυξημένη δραστηριότητα σε αρουραίους που ανακαλούν με επιτυχία την εξαφάνιση.Εκτός από τις προβλέψεις IL, η νευρική δραστηριότητα σε ορισμένες περιοχές της κλείδας και του κοιλιακού ιππόκαμπου αυξήθηκε σε αρουραίους που υποχώρησαν καλά.Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι τα μοτίβα ενδογενούς και εξωγενούς νευρικής δραστηριότητας που προβάλλονται στο IL σχετίζονται με ατομικές διαφορές στη μνήμη εξάλειψης του φόβου.
Πενήντα τέσσερις ενήλικες αρσενικοί αρουραίοι Sprague-Dawley (300-325 g κατά την άφιξη) που ελήφθησαν από την Charles River Laboratories (Raleigh, NC) χρησιμοποιήθηκαν ως υποκείμενα.Οι αρουραίοι στεγάστηκαν σε ζευγάρια, με ελεύθερη πρόσβαση σε τροφή και νερό, σε κύκλο φωτός/σκότους 12 ωρών (τα φώτα αναμμένα στις 7 π.μ.).Δύο ομάδες αρουραίων (n = 28 και n = 26) χρησιμοποιήθηκαν για αυτά τα πειράματα.Μετά τον αποκλεισμό θανάτου, χειρουργικό σφάλμα, έλλειψη έκφρασης GFP στο σημείο στόχο, κακή ποιότητα ιστού και προβλήματα συμπεριφοράς (εξηγούνται στις Μέθοδοι), η ομάδα ανάκλησης εξαφάνισης περιελάμβανε 21 αρουραίους και η ομάδα ανάκλησης φόβου περιλάμβανε 7 αρουραίους, κλουβιά.η ομάδα αποτελούνταν από 7 αρουραίους (35 αρουραίοι συμπεριλήφθηκαν στην τελική ανάλυση).Όλες οι διαδικασίες εγκρίθηκαν από την Επιτροπή Ιδρυματικής Φροντίδας και Χρήσης Ζώων του Πανεπιστημίου Stony Brook και ήταν σύμφωνα με τις Οδηγίες ARRIVE (https://arriveguidelines.org) και τις κατευθυντήριες γραμμές του NIH για τη φροντίδα και τη χρήση των εργαστηριακών ζώων.
Οι αρουραίοι υποβλήθηκαν σε θεραπεία δύο ημέρες πριν από την επέμβαση.Οι αρουραίοι αναισθητοποιήθηκαν με κεταμίνη (87 mg/kg) και ξυλαζίνη (10 mg/kg), τοποθετήθηκαν σε στερεοταξική συσκευή (Stoelting, Woodale, IL) και έλαβαν μονομερείς ενέσεις AAVrg-CAG-GFP (Addgene, 30) σε IL.(ισορροπήστε τις ενέσεις αριστερά και δεξιά).Για την ένεση, ένας σωληνίσκος 22 διαμετρημάτων χαμηλώθηκε στη θέση του (AP: + 3,00, ML: ± 0,6, DV: – 5,2).Εισαγάγετε έναν εσωτερικό σωληνίσκο 28G (συνδεδεμένος με μια αντλία έγχυσης μέσω σωλήνα PE 20) στον οδηγό σωληνίσκο για να απελευθερώσετε 0,6 μl ιού με ρυθμό 0,15 μl ανά λεπτό και αφήστε στη θέση του για 5 λεπτά αφού η έγχυση είναι άθικτη..Μετά τη ραφή, στους αρουραίους έγινε ένεση με μελοξικάμη (1 mg/kg) και μόλις μπόρεσαν να κινηθούν επέστρεψαν στα κλουβιά τους.Οι αρουραίοι κρατήθηκαν στα κλουβιά τους για περίπου 7 εβδομάδες για να επιτραπεί η ανάκτηση του ιού και η ανάδρομη μεταφορά.Τρεις αρουραίοι πέθαναν υπό αναισθησία, με αποτέλεσμα 51 αρουραίοι (94%) να αναρρώσουν επιτυχώς από τη χειρουργική επέμβαση.
Όλες οι διαδικασίες πραγματοποιήθηκαν σε θαλάμους προετοιμασίας 32 cm x 25 cm x 21 cm (Clever Systems Inc., Reston, VA) που στεγάζονται σε κουτιά απομόνωσης 45,7 cm x 43,2 cm x 43,2 cm (Clever Sys. Inc.).).Κατά τη διάρκεια των συνεδριών εκμάθησης εξαφάνισης και ανάκλησης εξαφάνισης, το περιβάλλον άλλαξε ώστε να είναι διαφορετικό από το αρχικό πλαίσιο υπό όρους.Η κατάσταση Α (δημιουργία φόβου) περιελάμβανε λαμπτήρες πυρακτώσεως 28 volt, οικιακούς λαμπτήρες (Chicago Micro Lighting, UK), ενώ η κατάσταση Β (εκπαίδευση κατάσβεσης, δοκιμή ανάκλησης κατάσβεσης και δοκιμή ανάκλησης φόβου) περιλάμβανε λάμπες υπερύθρων LED (Univivi IR Illuminator, Shenzhen) ., Κίνα;U48R).Επιπλέον, ενώ το Context A διαθέτει αντικραδασμικό δάπεδο με πηχάκια με τοίχους από ανοξείδωτο χάλυβα και πλεξιγκλάς, το Context B περιέχει βαμμένα μεταλλικά ένθετα τοποθετημένα στο δάπεδο και στους τοίχους.Το σχήμα του Context B τροποποιήθηκε επίσης τοποθετώντας ένα καμπύλο μεταλλικό ένθετο 33,5 cm x 21,3 cm σε έναν τυπικό θάλαμο κλιματισμού.Επιπλέον, στο πλαίσιο Α οι θάλαμοι σκουπίστηκαν με 5% οξικό οξύ, ενώ στο πλαίσιο Β οι θάλαμοι σκουπίστηκαν με 5% υδροξείδιο του αμμωνίου.Τέλος, στο πλαίσιο Β, οι αρουραίοι μεταφέρθηκαν στο δωμάτιο δοκιμών σε κουβάδες αντί να κυληθούν σε κλουβιά πάνω σε καρότσια.Οι συνεδρίες συμπεριφοράς καταγράφηκαν με την επάνω κάμερα και το σήμα βίντεο από κάθε κάμερα τροφοδοτήθηκε σε λογισμικό (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Reston, VA) που αξιολόγησε τη συμπεριφορά εξασθένισης με βάση τις αλλαγές εικονοστοιχείων.Οι παράμετροι επιλέχθηκαν έτσι ώστε η συμπεριφορά του ξεθωριάσματος που υπολογίζεται από τον υπολογιστή να ταιριάζει πολύ με τη συμπεριφορά εκπαιδευμένων παρατηρητών που εκτιμάται χειροκίνητα.Μια τιμή που υποδεικνύει το ποσοστό του χρόνου παγώματος που κυκλοφόρησε σε ένα διάστημα 30 δευτερολέπτων.
Όλα τα προγράμματα συμπεριφοράς εκτελούνται κατά τη διάρκεια του φωτεινού τμήματος του κύκλου φωτός/σκότους.Οι αρουραίοι υποβλήθηκαν σε θεραπεία 5 ημέρες πριν από την έναρξη των διαδικασιών συμπεριφοράς και μεταφέρθηκαν στο δωμάτιο συμπεριφοράς για τις τελευταίες τρεις ημέρες της θεραπείας.Την πρώτη ημέρα της δοκιμής συμπεριφοράς, μια ομάδα αρουραίων ανάκλησης εξαφάνισης τοποθετήθηκαν σε ένα αντανακλαστικό υπό συνθήκες φόβου, στη συνέχεια τοποθετήθηκαν στο πλαίσιο Α, δόθηκε μια περίοδος εγκλιματισμού 6 λεπτών και στη συνέχεια δόθηκαν και οι δύο συνδυασμοί 4 kHz, 76 dB, 30 s .τόνος και συνολικός τερματισμός, 1,0 mA, kick 1 s (2 λεπτά ITI).Για όλες τις ασκήσεις συμπεριφοράς, οι αρουραίοι επέστρεψαν στα κλουβιά 2 λεπτά μετά την τελευταία παρουσίαση του ερεθίσματος.Την επόμενη μέρα, αρουραίοι από την ομάδα ανάκλησης εξαφάνισης τοποθετήθηκαν στο δωμάτιο περιβάλλοντος Β και πραγματοποίησαν 20 παρουσιάσεις ήχου (2 λεπτά ITI) ως εκπαίδευση εξαφάνισης μετά από μια περίοδο εξοικείωσης 6 λεπτών.Την επόμενη μέρα, οι αρουραίοι στην ομάδα αναπαραγωγής εξαφάνισης εκτέθηκαν σε 4 τόνους στο πλαίσιο Β μετά από μια περίοδο εγκλιματισμού 6 λεπτών ως δοκιμή εξαφάνισης.Οι αρουραίοι στην ομάδα μνήμης εξαφάνισης εγχύθηκαν 60 λεπτά μετά τη συνεδρία συμπεριφοράς.Μια ομάδα αρουραίων ελέγχου που προκαλούσαν μνήμες φόβου υποβλήθηκαν στην ίδια διαδικασία την πρώτη ημέρα της απόκρισης εξαρτημένης από φόβο στο πλαίσιο Α. Σαράντα οκτώ ώρες αργότερα, οι αρουραίοι τοποθετήθηκαν στην αίθουσα περιβάλλοντος Β και υποβλήθηκαν σε 4 ηχητικές παρουσιάσεις (2- λεπτό ITI) ως δοκιμή ανάκλησης.φόβος μετά από περίοδο εγκλιματισμού 6 λεπτών.Οι αρουραίοι εγχύθηκαν 60 λεπτά μετά τη συνεδρία συμπεριφοράς.Μια ομάδα κατοικίδιων αρουραίων ελέγχου παρέμεινε στα κλουβιά τους καθ' όλη τη διάρκεια του πειράματος και εγχύθηκαν την ίδια ημέρα με τους πειραματικούς αρουραίους.Κάθε μία από τις δύο ομάδες αρουραίων χωρίστηκε σε δύο σειρές και ο αριθμός των ζώων σε κάθε ομάδα ισορροπήθηκε μεταξύ των σειρών.Ένας αρουραίος στην ομάδα αναμνήσεων φόβου αποκλείστηκε από την ανάλυση επειδή δεν έδειξε σημάδια προετοιμασίας φόβου (πάγωμα σε λιγότερο από 15% του χρόνου κατά τη διάρκεια του τεστ αναμνήσεων φόβου).Δείτε την Εικόνα 2Α για ένα διάγραμμα της γραμμής χρόνου συμπεριφοράς.
Οι αρουραίοι δέχθηκαν υπερβολική δόση διαλύματος Fatal Plus (100 mg/kg), στη συνέχεια εγχύθηκαν με παγωμένο 10% PBS ακολουθούμενο από 10% ρυθμισμένη φορμαλίνη.Ο εγκέφαλος αφαιρέθηκε και αποθηκεύτηκε σε διάλυμα σακχαρόζης 30% σε φορμαλίνη στους 4°C για περίπου 1 εβδομάδα.Στη συνέχεια ο εγκέφαλος καταψύχθηκε και κόπηκε σε κρυοστάτη πάχους 40 μm.Οι τομές αποθηκεύτηκαν διαδοχικά σε 10% PBS στους 4°C.Στη συνέχεια, πραγματοποιήθηκε ανοσοφθορισμός σε ελεύθερα επιπλέοντα τμήματα που περιείχαν την περιοχή του εγκεφάλου που ενδιαφέρει.Οι τομές πλύθηκαν 3 φορές σε 10% PBS για 5 λεπτά το καθένα.Οι τομές στη συνέχεια επωάστηκαν σε διάλυμα αποκλεισμού 5% κανονικού ορού κατσίκας για 2 ώρες σε θερμοκρασία δωματίου και στη συνέχεια πλύθηκαν άλλες τρεις φορές για 5 λεπτά η καθεμία σε 10% PBS.Οι τομές στη συνέχεια επωάστηκαν όλη τη νύχτα στους 4°C σε πρωτογενή αντισώματα (c-Fos, #2250, 1:500) (Cell Signaling, Danvers, ΜΑ) αραιωμένα σε 1% BSA σε 10% PBS.Την επόμενη μέρα, οι τομές πλύθηκαν σε 10% PBS για 30 λεπτά στους 4°C, στη συνέχεια 3 φορές για 5 λεπτά σε 10% PBS και επωάστηκαν με ένα δευτερεύον αντίσωμα (Alexa Fluor 594 κατσίκας κατά κουνελιού, κόκκινο συζυγές, 1:500 ).) (Invitrogen, Carlsbad, CA) σε θερμοκρασία δωματίου για 2 ώρες.Μετά από 3 επιπλέον πλύσεις σε 10% PBS για 5 λεπτά, οι τομές τοποθετήθηκαν σε γυάλινες πλάκες και σφραγίστηκαν με Fluoromount-G (Invitrogen).Δείτε αντιπροσωπευτικές εικόνες ανοσοχρώσης στο Σχήμα 3G.
Ένα μικροσκόπιο φθορισμού που χρησιμοποιεί μια ψηφιακή κάμερα Infinity3 (Lumenera, Οτάβα, Οντάριο, Καναδάς) και μια μηχανή φωτός (Lumencor, Beaverton, OR) συνδεδεμένη με ένα μικροσκόπιο Zeiss χρησιμοποιήθηκε για τη λήψη εικόνων από κάθε περιοχή του εγκεφάλου ενδιαφέροντος, συμπεριλαμβανομένων τμημάτων που περιέχουν IL χωρίς ανοσοφθορισμό.πραγματοποιηθεί για να επιβεβαιωθεί η σωστή τοποθέτηση του σημείου της ένεσης.Οι εικόνες που χρησιμοποιήθηκαν για την μέτρηση των κυττάρων ελήφθησαν σε μεγέθυνση 20x.Για κάθε τμήμα ιστού, τραβήξτε μία εικόνα με ένα φίλτρο που επιτρέπει την οπτικοποίηση του GFP και μία εικόνα με ένα φίλτρο που επιτρέπει την οπτικοποίηση του ερυθρού συζυγούς Alexa Fluor στο δευτερεύον αντίσωμα και το λογισμικό απεικόνισης (Infinity Analyze, έκδοση 3) χρησιμοποιήθηκε για την εικόνα επικάλυμμα.Αποκτήστε όλες τις εικόνες όλων των περιοχών του εγκεφάλου χρησιμοποιώντας τον ίδιο χρόνο έκθεσης και ρυθμίσεις κέρδους.Έξι αρουραίοι εξαιρέθηκαν από την ανάλυση επειδή η κύρια μετάδοση του ιού συνέβη εκτός του IL (88% ποσοστό επιτυχιών).Οκτώ ακόμη αρουραίοι αποκλείστηκαν επειδή, παρά τον ιό που προσβάλλει την IL, δεν έδειξαν επαρκή έκφραση GFP σε όλες τις περιοχές-στόχους του εγκεφάλου που ενδιαφέρουν.Επιπλέον, ένας αρουραίος αποκλείστηκε λόγω κακής ποιότητας ιστού.
Προσαρμόστε τη φωτεινότητα και την αντίθεση για να μειώσετε το θόρυβο φόντου στην εικόνα J (NIH) χρησιμοποιώντας την ίδια διαδικασία για κάθε εικόνα.Οι μετρήσεις κυττάρων για τα συνολικά ανάδρομα επισημασμένα κύτταρα, τα συνολικά επισημασμένα με Fos κύτταρα και τα συνολικά διπλά επισημασμένα κύτταρα πραγματοποιήθηκαν χειροκίνητα από τον πειραματιστή, ο οποίος δεν ταυτοποίησε τα ζώα, χρησιμοποιώντας το πρόσθετο κυτταρομέτρου Image J.Οι μετρήσεις κυττάρων κανονικοποιήθηκαν σε κύτταρα/mm2.Για να αναλυθεί η έκφραση Fos σε κύτταρα που προβάλλουν IL, ο αριθμός των διπλά επισημασμένων κυττάρων κανονικοποιήθηκε στον συνολικό αριθμό των ανάδρομα επισημασμένων κυττάρων.Για ανάλυση mBLA, mvHPC και pvHPC, οι μετρήσεις κυττάρων από πολλαπλές εικόνες 20x αθροίστηκαν και κανονικοποιήθηκαν σε κύτταρα/mm2.Για ανάλυση των υπόλοιπων περιοχών του εγκεφάλου, μια εικόνα 20x ή ένα τμήμα μιας εικόνας 20x αναλύθηκε και κανονικοποιήθηκε σε κύτταρα/mm2.Η ανάλυση vHPC περιελάμβανε περιοχές CA1, CA2 και υποκυρίαρχες vHPC.Το σχήμα 1 δείχνει τις περιοχές του εγκεφάλου που αναλύθηκαν με εικόνες που οριοθετούν το πρόσθιο-οπίσθιο όριο του επιπέδου.
Συντομογραφίες και θέση των περιοχών του εγκεφάλου που μας ενδιαφέρουν.Επεξήγηση των συντομογραφιών και των θέσεων των περιοχών του εγκεφάλου που δίνονται στο χειρόγραφο.Χάρτης εγκεφάλου δημόσιου τομέα λαμβάνεται από το Swanson (2004) Brain Map: Structure of the Rat Brain, 3rd Edition, με άδεια Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) ./), διαθέσιμο για λήψη στη διεύθυνση https://larrywswanson.com.
Το ποσοστό χρόνου παγώματος υπολογίζεται κατά μέσο όρο σε περίοδο αναπαραγωγής 30 δευτερολέπτων, εξαιρουμένων των ενδιάμεσων διαστημάτων.Τα ποσοστά ανάκλησης εξαφάνισης υπολογίστηκαν εκφράζοντας το ποσοστό του χρόνου εξαφάνισης κατά την ανάκληση εξαφάνισης ως το ποσοστό εξασθένισης κατά τις πρώτες 4 δοκιμές εκπαίδευσης εξαφάνισης (εξασθένιση κατά τη διάρκεια τεσσάρων τόνων ανάκλησης εξάλειψης/εξασθένιση κατά τη διάρκεια των πρώτων τεσσάρων τόνων προπόνησης εξαφάνισης*100).Οι χαμηλές βαθμολογίες υποδεικνύουν καλή μνήμη εξασθένισης και οι υψηλές βαθμολογίες δείχνουν κακή μνήμη εξασθένισης.Οι αρουραίοι ταξινομήθηκαν με βάση τη βαθμολογία ανάκλησης εξαφάνισης, με τους αρουραίους στο πρώτο τρίτο της βαθμολογίας ανάκλησης εξαφάνισης να ταξινομούνται ως "κακοί αρουραίοι εξαφάνισης" και οι αρουραίοι στα δύο τελευταία τρίτα της βαθμολογίας ανάκλησης εξαφάνισης ταξινομήθηκαν ως "καλοί".Αρουραίοι που εξασθενίζουν τη μνήμη.
Χρησιμοποιούνται μη παραμετρικές δοκιμές επειδή τα δεδομένα συχνά παραβιάζουν τις υποθέσεις σχετικά με την κανονική κατανομή ή/και την ομοιογένεια των διακυμάνσεων.Η συσχέτιση κατάταξης του Spearman χρησιμοποιήθηκε για να προσδιοριστεί εάν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ των βαθμολογιών ανάκλησης εξαφάνισης και των δεικτών Fos και των διπλών δεικτών σε περιοχές του εγκεφάλου ενδιαφέροντος σε όλους τους αρουραίους που υποβλήθηκαν στη δοκιμή ανάκλησης εξαφάνισης.Το Mann-Whitney U-test χρησιμοποιήθηκε για να προσδιοριστεί εάν υπήρχε διαφορά μεταξύ δύο ανεξάρτητων ομάδων.Η δοκιμή Kruskal-Wallis χρησιμοποιείται για να προσδιοριστεί εάν 2 ή περισσότερες ομάδες διαφέρουν μεταξύ τους και η δοκιμή πολλαπλής σύγκρισης Dunn χρησιμοποιείται όταν η στατιστική Kruskal-Wallis είναι σημαντική.Η εξασθένιση κατά τη διάρκεια της εκμάθησης της εξάλειψης αξιολογήθηκε χρησιμοποιώντας επαναλαμβανόμενες μετρήσεις ανάλυσης διακύμανσης με την ομάδα ως παράγοντα μεταξύ των υποκειμένων και το τεστ ως παράγοντα εντός του υποκειμένου. Τα αποτελέσματα θεωρήθηκαν σημαντικά όταν p < 0,05 για όλες τις στατιστικές δοκιμές. Τα αποτελέσματα θεωρήθηκαν σημαντικά όταν p < 0,05 για όλες τις στατιστικές δοκιμές. Результаты считались значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Τα αποτελέσματα θεωρήθηκαν σημαντικά σε p < 0,05 για όλες τις στατιστικές δοκιμές.当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的。当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的。 Результаты считались значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Τα αποτελέσματα θεωρήθηκαν σημαντικά σε p < 0,05 για όλες τις στατιστικές δοκιμές.
Το σχήμα 2 δείχνει το πειραματικό χρονοδιάγραμμα (Εικόνα 2Α) και την κατανομή συχνότητας όλων των αρουραίων που υποβλήθηκαν σε εξαφάνιση (Εικόνα 2Β). Οι αρουραίοι στις ομάδες καλής και φτωχής εξαφάνισης διέφεραν σημαντικά σε αυτές τις υπολογισμένες βαθμολογίες ανάκλησης εξαφάνισης (U = 0, p < 0,001) (Εικ. 2C). Οι αρουραίοι στις ομάδες καλής και φτωχής εξαφάνισης διέφεραν σημαντικά σε αυτές τις υπολογισμένες βαθμολογίες ανάκλησης εξαφάνισης (U = 0, p < 0,001) (Εικ. 2C). Крысы в ​​группах с хорошим и плохим угашением значительно различались по этим рассчитанным показателям припоминания угашения (U = 0, p <0,001) (ris. 2C). Οι αρουραίοι στις ομάδες καλής και φτωχής εξαφάνισης διέφεραν σημαντικά σε αυτούς τους υπολογισμένους ρυθμούς ανάκλησης εξαφάνισης (U=0, p<0,001) (Εικόνα 2C).在这些计算的灭绝回忆分数中，良好和不良灭绝组中的大鼠存在显，，20U.1 =C. U = 0, p <0,001) (图2C), В этих рассчитанных показателях припоминания угашения крысы в ​​группах с хорошим и плохим угашением значительно различались (U = 0, p <0,001) (ris. 2C). Σε αυτούς τους υπολογισμένους ρυθμούς ανάκλησης εξαφάνισης, οι αρουραίοι στις ομάδες καλής και φτωχής εξαφάνισης διέφεραν σημαντικά (U = 0, p < 0,001) (Εικόνα 2C).Δεν υπήρχε σημαντική διαφορά στον χρόνο κατάψυξης μεταξύ των ομάδων με καλή εξάλειψη, κακή εξάλειψη και ανάκληση φόβου κατά τη διάρκεια της βασικής περιόδου της συνεδρίας αντανακλαστικού υπό συνθήκες φόβου (X2(2) = 2,746, p = 0,253) (Εικόνα 2D).Επιπλέον, κατά την παρουσίαση του πρώτου τόνου του αντανακλαστικού υπό συνθήκες φόβου, δεν υπήρξε σημαντική διαφορά στο χρόνο κατάψυξης μεταξύ ομάδων με καλή εξάλειψη, κακή εξάλειψη και ανάκληση φόβου (Χ2(2) = 1,107, p = 0,575), καθώς καθώς και κατά τον φόβο κατά τους δεύτερους τόνους.Κατά τη διάρκεια της συνεδρίας προετοιμασίας, υπήρχε σημαντική διαφορά στον χρόνο κατάψυξης μεταξύ των ομάδων με καλή εξάλειψη, κακή εξάλειψη και ανάκληση φόβου (X2(2) = 2.214, p = 0.331) (Εικόνα 2D).Επίσης, δεν υπήρξε σημαντική διαφορά στον χρόνο εξαφάνισης μεταξύ καλών και φτωχών ομάδων εξάλειψης κατά τη διάρκεια της βασικής περιόδου εκπαίδευσης εξαφάνισης (U = 45,00, p = 0,799) (Εικόνα 2D). Στη συνέχεια, υπήρξε μια σημαντική κύρια επίδραση του δοκιμαστικού μπλοκ (5 τόνοι ανά μπλοκ) στον χρόνο που αφιερώθηκε στην κατάψυξη κατά τη διάρκεια της προπόνησης εξάλειψης (F (2.884, 54.80) = 8.331, p < 0.001), υποδεικνύοντας ότι συνέβη η εκμάθηση εξαφάνισης (Εικ. 2D ). Στη συνέχεια, υπήρξε μια σημαντική κύρια επίδραση του δοκιμαστικού μπλοκ (5 τόνοι ανά μπλοκ) στον χρόνο που αφιερώθηκε στην κατάψυξη κατά τη διάρκεια της προπόνησης εξάλειψης (F (2.884, 54.80) = 8.331, p < 0.001), υποδεικνύοντας ότι συνέβη η εκμάθηση εξαφάνισης (Εικ. 2D ). Υπενθυμίζεται ότι το βασικό αποτέλεσμα του προβλήματος (5 τόννοι σε ένα τετράγωνο) για το χρόνο, για την ώρα του χρόνου (F (2,884, 54,80) = 8,331, σ. рис. 2D). Υπήρχε τότε μια σημαντική κύρια επίδραση του δοκιμαστικού μπλοκ (5 τόνοι ανά μπλοκ) στον χρόνο που χρειάστηκε για να παγώσει κατά τη διάρκεια της εκπαίδευσης στην εξάλειψη (F(2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), υποδεικνύοντας ότι λάμβανε χώρα η εκμάθηση εξαφάνισης (Εικ. . 2D). ).接下来，在消退训练期间，试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主效应（F（2.884，54.80）=8.331，p < 0.001），表明发生了消退学习（图2D） ） .接下来，在消退训练期间，试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主效应（F（2.884，54.80）=8.331，p < 0.001），表明发生了消退学习（图2D） ） . Γιατέμ, σε χρονική περίοδο, προηγούμενα μπλοκ (5 τόνοι σε ένα τετράγωνο) αποκαλύφθηκε ουσιαστικά η βασική επιβάρυνση των χρονικών διαστημάτων (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), . 2D). Στη συνέχεια, κατά τη διάρκεια της εκμάθησης εξαφάνισης, τα δοκιμαστικά μπλοκ (5 τόνοι ανά μπλοκ) είχαν σημαντική κύρια επίδραση στον χρόνο εξασθένισης (F(2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), υποδεικνύοντας ότι λάμβανε χώρα εκμάθηση εξάλειψης (Εικ. .2D) .Ωστόσο, η ομάδα εξαφάνισης (F(1, 19) = 3,091, p = 0,095) δεν είχε σημαντική επίδραση στον χρόνο εξασθένισης καθ' όλη την περίοδο εκπαίδευσης εξαφάνισης και δεν υπήρξε αλληλεπίδραση μεταξύ του δοκιμαστικού μπλοκ και της ομάδας εξαφάνισης (F(4 , 19)) .76) = 1,890, p = 0,121) (Εικ. 2D). Κατά τη διάρκεια της δοκιμαστικής περιόδου, υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ των ομάδων καλής εξάλειψης, κακής εξάλειψης και ανάκλησης φόβου στον χρόνο που αφιερώθηκε στην κατάψυξη κατά τη διάρκεια της βασικής περιόδου (X2 (2) = 8,569, p = 0,014) έτσι ώστε η ομάδα ανάκλησης φόβου πάγωσε σημαντικά περισσότερο από την ομάδα καλής κατάταξης (Μέση διαφορά κατάταξης = 10,57, p = 0,017), αλλά όχι την ομάδα κακής κατάταξης (Μέση διαφορά κατάταξης = − 3,714, p > 0,999) (Εικ. 2D). Κατά τη διάρκεια της δοκιμαστικής περιόδου, υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ των ομάδων καλής εξάλειψης, κακής εξάλειψης και ανάκλησης φόβου στον χρόνο που αφιερώθηκε στην κατάψυξη κατά τη διάρκεια της βασικής περιόδου (X2 (2) = 8,569, p = 0,014) έτσι ώστε η ομάδα ανάκλησης φόβου πάγωσε σημαντικά περισσότερο από την ομάδα καλής κατάταξης (Μέση διαφορά κατάταξης = 10,57, p = 0,017), αλλά όχι την ομάδα κακής κατάταξης (Μέση διαφορά κατάταξης = − 3,714, p > 0,999) (Εικ. 2D).Κατά τη διάρκεια της δοκιμαστικής περιόδου, υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ των ομάδων καλής εξάλειψης, κακής εξαφάνισης και ανάκλησης φόβου σε χρόνο που αφιερώθηκε στην κατάψυξη κατά τη διάρκεια της βασικής περιόδου (X2(2) = 8,569, p = 0,014), έτσι ώστε η ομάδα ανάκλησης φόβου πάγωσε σημαντικά .περισσότερο, чем στην ομάδα хорошего вымирания (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), αλλά δεν είναι στην ομάδα плохого вымирания (средняя разница рангов = -3,714, p> 0,999) (ris. 2D). μεγαλύτερη από ό,τι στην ομάδα καλής εξάλειψης (μέση διαφορά κατάταξης = 10,57, p = 0,017) αλλά όχι στην ομάδα κακής εξάλειψης (μέση διαφορά κατάταξης = -3,714, p > 0,999) (Εικόνα 2Δ).(2) = 8.569, p = 0.014), 因此 回忆组 冻结 冻结 超过 良好 良好 的 的 灭绝 组 组 组 组 组 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 的 的（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差的灭绝组（平均秩差= – 3,714，p > 0,9）D）在 测试 期间 期间 良好 良好 良好 消退组 退组 退组 恐惧 在 基线期 冻结 时间 时间 方面 存在 存在 显着 差异 差异 (x2 (2) = 8.569, p = 0.014),组 组 组（平均秩差= 10.57，p = 0.017），但不是差绝组（平均秉差= – 3.714（（，9D В течение периода тестирования наблюдалась значительная разница между группой со хорошим угашением, ομαδική ομάδα με όρεξη και ομαδική ανησυχία με ανησυχία σε σημεία зрения времени замирания на исходном угашеним (X2,00, 2). , чем группа с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не группа с плохим вымиранием (средняя разница рангов = -3,714, p> 0,999) (ρισ. 2D). Κατά τη διάρκεια της περιόδου δοκιμής, υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ της ομάδας καλής εξάλειψης, της ομάδας φτωχής εξάλειψης και της ομάδας ανάκλησης φόβου ως προς τον χρόνο κατάψυξης κατά την έναρξη (X2(2) = 8,569, p = 0,014), επομένως η ανάκληση φόβου η ομάδα παγώνει σημαντικά πιο συχνά από την ομάδα με καλή εξάλειψη (μέση διαφορά κατάταξης = 10,57, p = 0,017) αλλά όχι η ομάδα με κακή εξάλειψη (μέση διαφορά κατάταξης = -3,714, p > 0,999) (Εικόνα 2Δ).Η ομάδα καλής εξάλειψης, η ομάδα κακής εξάλειψης και η ομάδα ανάκλησης φόβου είχαν επίσης σημαντικά διαφορετικούς χρόνους εξαφάνισης κατά την παρουσίαση τόνου της δοκιμαστικής συνεδρίας (X2(2) = 14,93, p = 0,001), επομένως η ομάδα καλής εξάλειψης είχε σημαντικά λιγότερους χρόνος.χρόνος κατάψυξης από ό,τι στην ομάδα ασθενούς κατάταξης (μέση διαφορά κατάταξης = 9,286, p = 0,044) και στην ομάδα μνήμης φόβου (μέση διαφορά κατάταξης = 13,86, p = 0,001) (Εικ. 2D).
Ατομικές διαφορές στην ανάμνηση της εξαφάνισης.(Α) Περίγραμμα χειρουργικών και συμπεριφορικών διαδικασιών.(Β) Κατανομή συχνότητας που δείχνει μεμονωμένες διαφορές στις βαθμολογίες μνήμης που εξαφανίζονται.(Γ) Απόδειξη ότι οι ομάδες που σχεδιάστηκαν με βάση τις υπολογισμένες βαθμολογίες ανάκλησης εξαφάνισης αντιπροσωπεύουν δύο διαφορετικούς φαινότυπους.(Δ) Μέσο ποσοστό χρόνου που οι αρουραίοι παγώνουν για κακή εξαφάνιση, καλή εξαφάνιση και ανάκληση φόβου σε κύτταρα 30 δευτερολέπτων μιας συνεδρίας εξαρτώμενου αντανακλαστικού φόβου, σε τόνους 20, 30 δευτερολέπτων, που κατέρρευσαν σε 5 τετράγωνα κατά τη διάρκεια της συνεδρίας εκμάθησης εξαφάνισης (4 τόνοι ) .το καθένα), και σε τέσσερις τόνους σε συνεδρίες αναμνήσεων ξεθώριασμα και αναμνήσεις φόβου.Οι γραμμές σφάλματος αντιπροσωπεύουν την τυπική απόκλιση του μέσου όρου. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05,**p < 0,01,***p < 0,001,****p < 0,0001. *p < 0,05,**p < 0,01,***p < 0,001,****p < 0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001.
Ένας ανάδρομος δείκτης εγχύθηκε στο IL (Εικ. 3Α) και προσδιορίστηκε ο αριθμός των κυττάρων GFP+ κατά μήκος του πρόσθιου-οπίσθιου άξονα της περιοχής ενδιαφέροντος (Σχ. 3Β-ΣΤ).Υπήρχε σημαντική διαφορά στον αριθμό των κυττάρων GFP+ μεταξύ του πρόσθιου, του μεσαίου και του οπίσθιου PVT (X2(2) = 8.200, p = 0.017), επομένως το mPVT έδειξε σημαντικά περισσότερα κύτταρα GFP+ από το aPVT (μέση κατάταξη) Διαφορ.= 18,37, p = 0,035) και pPVT (μέση κατάταξη Διαφορά = 17,71, p = 0,045) (Εικ. 3C).Αν και αρκετά ζώα δεν ανίχνευσαν κύτταρα GFP+ στο pCLA και επομένως δεν μπορούσαν να χαρτογραφήσουν τη δραστηριότητα σε αυτήν την περιοχή, δεν υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ του πρόσθιου, του μέσου και του οπίσθιου CLA (Χ2(2) = 5,596, p = 0,061).Αριθμός κυττάρων GFP+ (Εικόνα 3D).Στη συνέχεια, δεδομένου ότι ορισμένα κύτταρα GFP+ βρέθηκαν σε aBLA ή avHPC σε αρκετούς αρουραίους, αναλύθηκαν μόνο το μέσο και το πίσω μέρος αυτών των περιοχών.Το μεσαίο και το οπίσθιο BLA (U=393, p=0,009) διέφεραν σημαντικά στον αριθμό των κυττάρων GFP+, έτσι το pBLA έδειξε περισσότερες προβολές IL από το mBLA (Εικόνα 3Ε).Ομοίως, υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ των μεσαίων και των οπίσθιων vHPC, έτσι τα pvHPC έδειξαν περισσότερες προβολές IL από τα mvHPC (U = 403,5, p = 0,014) (Εικόνα 3F).Το σχήμα 3G είναι μια υποδειγματική εικόνα που δείχνει Fos, aavRG-GFP και διπλά επισημασμένα κύτταρα.
Ποσοτικοποιήστε τους προσαγωγούς IL σε ολόκληρη την περιοχή του εγκεφάλου που σας ενδιαφέρει.(Α) Σχηματική αναπαράσταση της κατανομής του aavRG-CAG-GFP σε πλήρη IL αρουραίου.(Β) Αντιπροσωπευτικές εικόνες ανάδρομων δεικτών σε διαφορετικές προσθιοοπίσθιες θέσεις στην περιοχή ενδιαφέροντος του εγκεφάλου.Ποσοτικοποίηση της ανάδρομης επισήμανσης κατά μήκος του προσθιοοπίσθιου άξονα (C) του παρακοιλιακού θαλάμου, (D) της κλείδας, (Ε) της βασεοπλάγιας αμυγδαλής και (F) του κοιλιακού ιππόκαμπου.(Ζ) Αντιπροσωπευτικές εικόνες που δείχνουν ανάδρομη επισήμανση aavRG, επισήμανση Fos και διπλή επισήμανση aavRG και Fos σε aPVT.Οι γραμμές σφάλματος αντιπροσωπεύουν την τυπική απόκλιση του μέσου όρου. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.Μπάρα κλίμακας 100 μm.Ο χάρτης εγκεφάλου δημόσιου τομέα στο πλαίσιο Α αναπαράγεται από το Swanson (2004) Brain Map: Rat Brain Structure, 3rd Edition, με άδεια χρήσης Creative Commons Attribution-NonCommons 4.0 International License (https://creativecommons.org/licenses/by-nc )./4.0/) διαθέσιμο για λήψη στη διεύθυνση https://larrywswanson.com.
Η συνολική και ειδική για την προβολή IL δραστηριότητα Fos αναλύθηκε σε aPVT, mPVT και pPVT σε όλους τους αρουραίους.Δεν υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ καλής εξαφάνισης, κακής εξαφάνισης, ανάκλησης φόβου και ομάδων οικιακών κυττάρων στην έκφραση Fos σε aPVT (X2(3) = 3,888, p = 0,274) (Εικ. 4Α), ούτε υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ του Fos σε aPVT μεταξύ έκφρασης και ανάκλησης εξαφάνισης (rs = 0,092, p = 0,691) (Εικόνα 4Β) ή μεταξύ έκφρασης Fos σε προσαγωγούς IL aPVT και ανάκλησης εξάλειψης (rs = 0,143, p = 0,537) (Εικόνα 4D).Ωστόσο, στους προσαγωγούς aPVT IL, η έκφραση Fos διέφερε σημαντικά μεταξύ της καλής εξαφάνισης, της κακής εξαφάνισης, της ανάκλησης φόβου και των ομάδων οικιακών κυττάρων (X2(3) = 15,05, p = 0,002), επομένως η ομάδα ανάκλησης φόβου έδειξε σχετικά καλή εξαφάνιση.ομάδες παλινδρόμησης (μέση διαφορά κατάταξης = 11,54, p = 0,003), κακή παλινδρόμηση (μέση διαφορά κατάταξης = 10,57, p = 0,034) και αρχικό κελί (μέση διαφορά κατάταξης = 12,79, p = 0,005) (Εικ. 4C).Περαιτέρω, δεν υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ καλής εξαφάνισης, κακής εξαφάνισης, ανάκλησης φόβου και οικιακών κυττάρων για έκφραση Fos σε mPVT (X2(3) = 2,272, p = 0,518) (Εικ. 4Ε) και για έκφραση Fos σε mPVT..Σημαντική συσχέτιση με την ανάκληση εξαφάνισης (rs = 0,168 p = 0,468) (Εικόνα 4F).Παρόλο που υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ των ομάδων καλών, κακών, ανακλήσεων φόβου και οικιακών κυττάρων στην έκφραση Fos σε κύτταρα προσαγωγών IL mPVT (X2(3) = 9,252, p = 0,026), η εκ των υστέρων σύγκριση δεν αποκάλυψε κανένα ή δύο.Σημαντικές διαφορές μεταξύ των ομάδων (Εικόνα 4G).Επιπλέον, δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης Fos σε κύτταρα mPVT προσαγωγών IL και της ανάκλησης εξαφάνισης (rs = 0,174, p = 0,450) (Εικόνα 4Η). Στη συνέχεια, υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ των ομάδων καλής εξαφάνισης, κακής εξαφάνισης, ανάκλησης φόβου και οικιακού κλουβιού στην έκφραση Fos στο pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), έτσι ώστε η ομάδα καλής εξαφάνισης (Μέση κατάταξη Διαφορά = 14,96, p = 0,010), αλλά όχι η κακή εξάλειψη (Μέση διαφορά κατάταξης = 12,86, p = 0,113) ή η ομάδα ανάκλησης φόβου (Μέση διαφορά κατάταξης = 2,571, p > 0,999), εμφάνισε περισσότερη έκφραση Fos από την ομάδα οικιακού κλουβιού (Εικ. 4I). Στη συνέχεια, υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ των ομάδων καλής εξαφάνισης, κακής εξαφάνισης, ανάκλησης φόβου και οικιακού κλουβιού στην έκφραση Fos στο pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), έτσι ώστε η ομάδα καλής εξαφάνισης (Μέση κατάταξη Διαφορά = 14,96, p = 0,010), αλλά όχι η κακή εξάλειψη (Μέση διαφορά κατάταξης = 12,86, p = 0,113) ή η ομάδα ανάκλησης φόβου (Μέση διαφορά κατάταξης = 2,571, p > 0,999), εμφάνισε περισσότερη έκφραση Fos από την ομάδα οικιακού κλουβιού (Εικ. 4I). Далее, наблюдалась значительная разница между группами со хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой в ​​экспрессии Fos σε pPVT (X2 (3) = 13,89, σ. 13,89, σ. Διαφορ. = 14,96, p = 0,010), αλλά δεν είναι στην ομάδα плохого угашения (средняя ранговая разница = 12,86, p = 0,113) ή ομαδική βοσπονιά ή στράτευμα (μέτρηση στριμωγμένης γης = 2,9,5) выраженная экспрессия Fos, чем στην ομάδα grouppa домашних клеток (рис. 4I). Περαιτέρω, υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ καλής εξαφάνισης, κακής εξαφάνισης, ανάκλησης φόβου και ομάδων οικιακών κυττάρων στην έκφραση Fos σε pPVT (X2(3)=13,89, p=0,003), έτσι ώστε η ομάδα καλής εξαφάνισης (μέση κατάταξη Διαφ. = 14,96, p = 0,010), αλλά όχι στην ομάδα φτωχής εξάλειψης (μέση διαφορά κατάταξης = 12,86, p = 0,113) ή στην ομάδα μνήμης φόβου (μέση διαφορά κατάταξης = 2,571, p > 0,999), έδειξε πιο έντονη έκφραση Fos σε σχέση με την ομάδα οικιακών κυττάρων (Εικόνα 4I).其次 ， ， 差消 、 、 恐惧 恐惧 和 家笼组 之间 之间 存在 显着 差异 (x2 (3) = 13,89, p = 0,003) 使得 消组 消组= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(Μέση κατάταξη διαφορά. = 12,86, p = 0,113) ）.= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(Μέση διαφορά κατάταξης = 12,86, p = 0,113) ）。Δεύτερον, υπήρχαν σημαντικές διαφορές στην έκφραση Fos στο pPVT μεταξύ των ομάδων καλών, κακών, ανακλήσεων φόβου και οικιακών κυττάρων (X2(3) = 13,89, p = 0,003), καθιστώντας την ομάδα καλής πρόσληψης (μέση διαφορά κατάταξης = 14,96)., p = 0,010), но не нуже по угашению (среднаяя разница рангов = 12,86, p = 0,113) ή ομαδική ομάδα отзыва страха (средняя разница рангов = 2,571, p > 0,999), чем σε ομάδα ανθρώπων (рисне 4) . , p = 0,010), αλλά όχι χειρότερα στην εξάλειψη (μέση διαφορά κατάταξης = 12,86, p = 0,113) ή στην ομάδα ανάκλησης φόβου (μέση διαφορά κατάταξης = 2,571, p > 0,999) από την ομάδα των εγχώριων κυττάρων (Εικόνα 4I)..Ωστόσο, δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης pPVT Fos και της ανάκλησης εξαφάνισης (rs = 0,051, p = 0,825) (Εικόνα 4J).Τέλος, υπήρχε σημαντική διαφορά στην έκφραση Fos στους προσαγωγούς pPVT IL μεταξύ ομάδων με καλή εξάλειψη, φτωχή εξάλειψη, μνήμες φόβου και στα κύτταρα του σπιτιού (X2(3) = 12,34 p = 0,006), επομένως καλή έκφραση Fos στην IL- ήταν χειρότερη από ό,τι στις ομάδες εξάλειψης (μέση διαφορά κατάταξης = 12,54, p = 0,014) και στο αρχικό κύτταρο (μέση διαφορά κατάταξης = 12,89, p = 0,049) (Εικ. 4K) και συσχετίστηκε σημαντικά με προσαγωγούς IL εντός του pPVT Μεταξύ ενεργοποίησης και ανάκληση της εξαφάνισης, καλύτερη ανάκληση εξαφάνισης συσχετίστηκε με μεγαλύτερη ενεργοποίηση αυτών των προσαγωγών IL (rs = -0,438, p = 0,047) (Εικόνα 4L).
Η δραστηριότητα του Fos αυξήθηκε στους προσαγωγούς IL του οπίσθιου παρακοιλιακού θαλάμου (PVT) σε αρουραίους, οι οποίοι εμφάνισαν καλή παλινδρόμηση.(Α) Δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές μεταξύ των ομάδων στην έκφραση Fos στο aPVT.(Β) Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης Fos και της ανάκλησης εξαφάνισης στο aPVT.(Γ) Η ομάδα ανάκλησης φόβου έδειξε αυξημένη έκφραση Fos στους προσαγωγούς IL σε σύγκριση με όλες τις άλλες ομάδες.(Δ) Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης Fos σε προσαγωγούς IL και της ανάκλησης εξαφάνισης στο aPVT.(Ε) Δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές μεταξύ ομάδων στην έκφραση Fos στο mPVT.(ΣΤ) Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ έκφρασης Fos και μνήμης εξαφάνισης στο mPVT.(Ζ) Η έκφραση Fos σε προσαγωγικά κύτταρα IL σε mPVT δεν διέφερε σημαντικά μεταξύ των ομάδων.(Η) Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης Fos σε προσαγωγούς IL και της ανάκλησης εξαφάνισης σε mPVT.(I) Μια καλά εξαφανισμένη ομάδα, αλλά καμία άλλη ομάδα, έδειξε αυξημένη δραστηριότητα Fos στο pPVT σε σύγκριση με την ομάδα του οικιακού κλουβιού.(J) Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης Fos και της ανάκλησης εξαφάνισης στο pPVT.(Κ) Η ομάδα καλής εξάλειψης έδειξε αυξημένη έκφραση Fos σε προσαγωγικά κύτταρα IL σε σύγκριση με την ομάδα ασθενούς εξάλειψης και την ομάδα των εγχώριων κυττάρων.(L) Υπάρχει σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης Fos στους προσαγωγούς IL και της ανάκλησης εξαφάνισης, επομένως η καλή ανάκληση εξαφάνισης σχετίζεται με μεγαλύτερη έκφραση Fos στους προσαγωγούς IL.Οι γραμμές σφάλματος αντιπροσωπεύουν την τυπική απόκλιση του μέσου όρου. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.
Η συνολική και ειδική για την προβολή IL δραστηριότητα Fos σε aCLA και mCLA αρουραίων αναλύθηκε στη συνέχεια σε όλες τις ομάδες. Υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ των ομάδων καλής εξαφάνισης, κακής εξαφάνισης, ανάκλησης φόβου και οικιακού κλουβιού στην έκφραση Fos στο aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036) έτσι ώστε η ομάδα ανάκλησης φόβου (Μέση κατάταξη διαφορά = 14,50, p = 0,049), αλλά ούτε οι φτωχές ομάδες (Mean Rank Diff. = 10,21, p = 0,373) ούτε καλή απόσβεση (Mean Rank Diff. = 4,607, p > 0,999) δεν εμφάνισαν περισσότερη έκφραση Fos από την ομάδα home cage ( Εικ. 5Α). Υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ των ομάδων καλής εξαφάνισης, κακής εξαφάνισης, ανάκλησης φόβου και οικιακού κλουβιού στην έκφραση Fos στο aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036) έτσι ώστε η ομάδα ανάκλησης φόβου (Μέση κατάταξη διαφορά = 14,50, p = 0,049), αλλά ούτε οι φτωχές ομάδες (Mean Rank Diff. = 10,21, p = 0,373) ούτε καλή απόσβεση (Mean Rank Diff. = 4,607, p > 0,999) δεν εμφάνισαν περισσότερη έκφραση Fos από την ομάδα home cage ( Εικ. 5Α). Μεζού γκρουππαμι με хорошим угашением, плохим угашением, припоминанием страха και εγχώριες φυλές απορρόφηση μεγάλης έκτασης στην εκφραστική Fos in aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,0036), έως 4 = 0,049), αλλά ни плохая (среднаяя ранговая разница = 10,21, p = 0,373), ни ομάδα με хорошим вымиранием (средняя ранговая разница = 4,607, σ > 0,9999) 5Α). Υπήρχε σημαντική διαφορά στην έκφραση aCLA Fos μεταξύ των ομάδων καλής εξάλειψης, κακής εξαφάνισης, ανάκλησης φόβου και οικιακών κυττάρων (X2(3) = 8,455, p = 0,036), έτσι ώστε η ομάδα ανάκλησης φόβου (μέση διαφορά κατάταξης = 14,50, p = 0,049), αλλά ούτε η φτωχή (μέση διαφορά κατάταξης = 10,21, p = 0,373) ούτε η ομάδα καλής εξάλειψης (μέση διαφορά κατάταξης = 4,607, p > 0,999) έδειξαν περισσότερη έκφραση Fos από την ομάδα των αρχικών κυττάρων (Εικ. .5Α) . (x2 (3) = 8.455, p = 0.036), 因此 恐惧 回忆组 (μέση διαφορά κατάταξης = 14.50, p = 0.049），但无论是差（平均秩差= 10.21，p = 0.373）还是良好灭绝（平均秩差= 4.607，p > 0.999）组，都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图5A) . (X2 (3) = 8.455, p = 0.036), 因此 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 ( Διαφορά κατάταξης = 14.50, p = p = p = p = p = 14. 0.049), 但 无论是 差 平均 秩差 秩差 = 10.21, p = 0.373) 良好 灭绝 灭绝 平均 秩差 秩差 = 4.607, p> 0,999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 5a) 。 Была значительная разница между группами со хорошим угашением, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой по экспрессии Fos in aCLA (X2(3) = 8,455, p = 0,036), (1, 5,00, 15:00) = 0,049), αλλά ο γκρουππы με άνθος (μέση τιμή rangov = 10,21, p = 0,373) και со хорошим вымиранием (средна рангов = 4,607, p > 0,999) 5Α). Υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ καλής εξαφάνισης, κακής εξαφάνισης, ανάκλησης φόβου και ομάδων οικιακών κυττάρων στην έκφραση aCLA Fos (X2(3) = 8,455, p = 0,036), άρα ομάδα ανάκλησης φόβου (μέση διαφορά κατάταξης = 14,50), p = 0,049 ), αλλά ομάδες με φτωχή (μέση διαφορά κατάταξης = 10,21, p = 0,373) και καλή εξάλειψη (μέση διαφορά κατάταξης = 4,607, p > 0,999) εμφάνισαν υψηλότερη έκφραση Fos από την ομάδα οικιακών κυττάρων (Εικ. 5Α). .Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της συνολικής έκφρασης Fos σε (rs = 0,036, p = 0,876) (Εικόνα 5Β) ή της έκφρασης Fos σε προσαγωγά κύτταρα IL aCLA (rs = -0,282, p = 0,215) και της ανάκλησης εξαφάνισης (Εικόνα 5Β)..5D), δεν υπήρχε επίσης σημαντική διαφορά μεταξύ της καλής εξαφάνισης, της κακής εξαφάνισης, της ανάκλησης φόβου και των ομάδων οικιακών κυττάρων στην έκφραση Fos σε προσαγωγούς aCLA IL (X2(3) = 6,722, p = 0,081) (Εικόνα 5C)..). Στη συνέχεια, υπήρχε μια σημαντική διαφορά μεταξύ των ομάδων καλής εξαφάνισης, κακής εξαφάνισης, ανάκλησης φόβου και οικιακού κλουβιού στην έκφραση Fos στο mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018) έτσι ώστε η ομάδα καλής εξαφάνισης (Μέση κατάταξη διαφορά . = 12,93, p = 0,038), αλλά ούτε η κακή εξάλειψη (Μέση διαφορά κατάταξης = 5,143, p > 0,999) ούτε οι ομάδες ανάκλησης φόβου (Μέση διαφορά κατάταξης = 14,00, p = 0,063) εμφάνισαν σημαντικά μεγαλύτερη έκφραση Fos στο mCLA σε σχέση με την ομάδα του οικιακού κλουβιού (Εικ. 5Ε). Στη συνέχεια, υπήρχε μια σημαντική διαφορά μεταξύ των ομάδων καλής εξαφάνισης, κακής εξαφάνισης, ανάκλησης φόβου και οικιακού κλουβιού στην έκφραση Fos στο mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018) έτσι ώστε η ομάδα καλής εξαφάνισης (Μέση κατάταξη διαφορά . = 12,93, p = 0,038), αλλά ούτε η κακή εξάλειψη (Μέση διαφορά κατάταξης = 5,143, p > 0,999) ούτε οι ομάδες ανάκλησης φόβου (Μέση διαφορά κατάταξης = 14,00, p = 0,063) εμφάνισαν σημαντικά μεγαλύτερη έκφραση Fos στο mCLA σε σχέση με την ομάδα του οικιακού κλουβιού (Εικ. 5Ε). ομαδικό περιεχόμενο σε μια ομάδα ατόμων με μεγάλη προσοχή σε μια ομάδα, με όρεξη, σε ομαδικό επίπεδο, σε μια ομάδα φύλλων στο σπίτι σας Fos in mCLA (X2 (3) = 10,12 νωρίτερα, σ. rangov . = 12,93, p = 0,038), αλλά ни grrupпы плохого угашения (среднаяя ранговая разница = 5.143, p > 0.999), ни gruppы отзыва не страха (средняя ранговая разница,3 = 14) эxpressii Fos σε mCLA. Υπήρχε τότε μια σημαντική διαφορά μεταξύ καλής εξαφάνισης, κακής εξαφάνισης, αναμνήσεων φόβου και ομάδων οικιακών κυττάρων στην έκφραση mCLA Fos (X2(3) = 10,12, p = 0,018), έτσι ώστε η ομάδα καλής εξαφάνισης (μέση κατάταξη διαφοράς = 12,93, p = 0,038), αλλά ούτε οι φτωχές ομάδες εξαφάνισης (μέση διαφορά κατάταξης = 5,143, p > 0,999) ούτε οι ομάδες ανάκλησης φόβου (μέση διαφορά κατάταξης = 14,00, p = 0,063) έδειξαν σημαντικά μεγαλύτερη έκφραση Fos στο mCLA.σε σύγκριση με την ομάδα του οικιακού κλουβιού (Εικόνα 5Ε).接下来 ， 在 mcla 中 的 fos 表达 ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 、 恐惧 回忆组 家庭 笼组 之间 显着 差异 （x2 （3） = 10.12 ， p = 0.018） ， 良好 （（（（（（ ((（) Μέση διαφορά κατάταξης .= 12.93, p = 0.038), 但 在 mcla 中, 弱消退 弱消退 显示 秩差 出 出 更 更 多 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的相对于家庭笼组（图5E）. = 12.93, p = 0.038), 在 在 mcla 中, 弱消退 弱消退 弱消退 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 更 多 多 多 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达相对于家庭笼组（图5E）。 Dalee, in эkspresssii Fos in mCLA naблюдалась значительная разница между группой со хорошим угасанием, ομαδική ομάδα με όχλημ ουγκασάνιεμ, ομαδική ομάδα με отзывом о στρατή και γκρούπα με σπίτι 2, 1, 1, 1 = 3, 1, 1 (X2) угашения (средняя разность рангов = 12,93, p = 0,038), но в mCLA ни слабое угасание (средняя разница рангов = 5,143, p > 0,999), ни группа отзыва страха (средняя разница рангов = 14,00, p = 0,999) = 0,063) έδειξε лучшую экспрессию Много Fos по сравнению со группой со домашней клеткой (Рисунок 5E). Περαιτέρω, υπήρχε σημαντική διαφορά στην έκφραση Fos στο mCLA μεταξύ της ομάδας καλής εξαφάνισης, της ομάδας φτωχής εξάλειψης, της ομάδας ανατροφοδότησης φόβου και της ομάδας των κυττάρων του σπιτιού (X2(3) = 10,12, p = 0,018), επομένως, η καλή εξαφάνιση (μέση διαφορά κατάταξης = 12,93, p = 0,038), αλλά στο mCLA ούτε η ασθενής εξάλειψη (μέση διαφορά κατάταξης = 5,143, p > 0,999) ούτε η ομάδα ανάκλησης φόβου (μέση διαφορά κατάταξης = 14,00, p = 0,999) = 0,063) Έκφραση Multi Fos σε σύγκριση με την ομάδα οικιακών κυττάρων (Εικόνα 5Ε).Ωστόσο, η συνολική έκφραση Fos σε mCLA (rs = 0,321, p = 0,156) (Εικ. 5F) ή σε κύτταρα προσαγωγού IL mCLA (rs = -0,121, p = 0,602) και ανάκληση εξαφάνισης (Εικ. 5Η), καμία σημαντική διαφορά μεταξύ ομάδες με καλή εξαφάνιση, φτωχή εξαφάνιση, ανάκληση φόβου και ένα οικιακό κύτταρο για έκφραση Fos σε προσαγωγά κύτταρα IL mCLA (Χ2(3)=4,923, p=0,178) (Εικόνα 5G).
Η δραστηριότητα του Fos ήταν αυξημένη στο μέσο της κλωστής σε αρουραίους με καλή μνήμη εξαφάνισης.(Α) Η ομάδα ανάκλησης φόβου, αλλά όχι οι άλλες ομάδες, εμφάνισαν αυξημένη δραστηριότητα Fos σε σύγκριση με την ομάδα οικιακών κυττάρων στο aCLA.(Β) Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης Fos στο aCLA και της ανάκλησης εξαφάνισης.(Γ) Η έκφραση Fos σε κύτταρα aCLA προσαγωγών IL δεν διέφερε σημαντικά μεταξύ των ομάδων.(Δ) Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης Fos σε προσαγωγούς IL και της ανάκλησης εξαφάνισης στο aCLA.(Ε) Η ομάδα που είχε εξαφανιστεί καλά, αλλά όχι οι άλλες ομάδες, εμφάνισαν αυξημένη δραστηριότητα Fos στο mCLA σε σύγκριση με την ομάδα των εγχώριων κυττάρων.(ΣΤ) Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης Fos και της ανάκλησης εξαφάνισης στο mCLA.(Ζ) Η έκφραση Fos σε προσαγωγά κύτταρα IL mCLA δεν διέφερε σημαντικά μεταξύ των ομάδων.(Η) Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης Fos σε προσαγωγούς IL και της ανάκλησης εξαφάνισης στο mCLA.Οι γραμμές σφάλματος αντιπροσωπεύουν την τυπική απόκλιση του μέσου όρου. *p < 0,05. *p < 0,05. *ρ < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *ρ < 0,05. *p < 0,05.
Στη συνέχεια, η συνολική και ειδική για την προβολή IL δραστηριότητα Fos σε mBLA και pBLA αναλύθηκε σε όλες τις ομάδες αρουραίων.Δεν υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ της καλής εξαφάνισης, της κακής εξαφάνισης, της ανάκλησης φόβου και των ομάδων οικιακών κυττάρων στην έκφραση Fos σε mBLA (Χ2(3)=0,944, p=0,815) (Εικόνα 6Α).Δεν υπήρχε επίσης σημαντική διαφορά μεταξύ των ομάδων με καλή παλινδρόμηση, φτωχή παλινδρόμηση, ανάκληση φόβου και έκφραση του οικιακού κυττάρου Fos σε προσαγωγά κύτταρα IL mBLA (Χ2(3)=0,518, p=0,915) (Εικόνα 6C).Επιπλέον, δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της συνολικής έκφρασης Fos σε mBLA (rs = 0,126, p = 0,588) (Εικόνα 6Β) και της έκφρασης Fos σε προσαγωγά κύτταρα IL mBLA (rs = 0,200, p = 0,385) (rs = 0,200, p = 0,385).p = 0,385).Εικόνα 6D) και ανάκληση εξαφάνισης.Δεν υπήρχε επίσης σημαντική διαφορά στην καλή εξαφάνιση, την κακή εξάλειψη, τη μνήμη φόβου και τις ομάδες οικιακών κυττάρων στην έκφραση Fos σε pBLA (X2(3) = 4,246, p = 0,236) (Εικ. 6Ε), και επίσης δεν υπήρχε σημαντική διαφορά σε pBLA Καλό.εξαφάνιση, φτωχή εξάλειψη, ανάκληση φόβου και οικιακές κυτταρικές ομάδες στην έκφραση Fos σε κύτταρα προσαγωγών IL (Χ2(3)=1,954, p=0,582) (Εικόνα 6G).Τέλος, συνολική έκφραση Fos σε pBLA (rs = 0,070, p = 0,762) (Εικ. 6F) και έκφραση Fos σε προσαγωγά κύτταρα pBLA IL (rs = 0,122, p = 0,597) και ανάκληση εξαφάνισης (Εικ. 6Η).
Οι μεμονωμένες διαφορές στην αναπαραγωγή εξαφάνισης δεν χαρτογραφήθηκαν σε διαφορές στην έκφραση Fos στη βασεοπλάγια αμυγδαλή.(Α) Δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές μεταξύ ομάδων στην έκφραση Fos στο mBLA.(Β) Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης Fos και της ανάκλησης εξαφάνισης στο mBLA.(Γ) Η έκφραση Fos σε προσαγωγά κύτταρα IL mBLA δεν διέφερε σημαντικά μεταξύ των ομάδων.(Δ) Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης Fos σε προσαγωγά κύτταρα IL και της ανάκλησης εξαφάνισης στο mBLA.(Ε) Δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές μεταξύ ομάδων στην έκφραση Fos στο pBLA.(ΣΤ) Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης Fos και της ανάκλησης εξαφάνισης στο pBLA.(Ζ) Η έκφραση Fos σε προσαγωγικά κύτταρα IL pBLA δεν διέφερε σημαντικά μεταξύ των ομάδων.(Η) Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης Fos σε προσαγωγά κύτταρα IL και της ανάκλησης εξαφάνισης στο pBLA.Οι γραμμές σφάλματος αντιπροσωπεύουν την τυπική απόκλιση του μέσου όρου.
Τέλος, η συνολική και η ειδική για την προβολή IL δραστηριότητα Fos αναλύθηκε σε mvHPC και pvHPC σε όλους τους αρουραίους. Υπήρχε μια σημαντική διαφορά μεταξύ των ομάδων καλής εξαφάνισης, κακής εξαφάνισης, ανάκλησης φόβου και οικιακού κλωβού στην έκφραση Fos στο mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045) έτσι ώστε η καλή εξάλειψη (Μέση διαφορά κατάταξης = 13,29 , p = 0,031), αλλά ούτε οι ομάδες κακής εξάλειψης (Μέση διαφορά κατάταξης = 6,857, p > 0,999) ούτε ανάκληση φόβου (Μέση διαφορά κατάταξης = 8.000, p = 0,864) έδειξαν περισσότερη έκφραση Fos από την ομάδα οικιακού κλωβού (Εικ. 7Α). Υπήρχε μια σημαντική διαφορά μεταξύ των ομάδων καλής εξαφάνισης, κακής εξαφάνισης, ανάκλησης φόβου και οικιακού κλωβού στην έκφραση Fos στο mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045) έτσι ώστε η καλή εξάλειψη (Μέση διαφορά κατάταξης = 13,29 , p = 0,031), αλλά ούτε οι ομάδες κακής εξάλειψης (Μέση διαφορά κατάταξης = 6,857, p > 0,999) ούτε ανάκληση φόβου (Μέση διαφορά κατάταξης = 8.000, p = 0,864) έδειξαν περισσότερη έκφραση Fos από την ομάδα οικιακού κλωβού (Εικ. 7Α). Между группами со хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и οικιακές κλέφτες κυκλοφόρησαν μεγάλης κλίμακας διαστάσεις σε εκφραστικές Fos σε mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045, ρ. = 0,031), αλλά ни στην ομάδαπαχ με την πλευχήμ ογκοσάνιεμ (μέτρηση λιγότερης συχνότητας = 6,857, p > 0,999), ни στην ομάδα με την ομάδα της κατηγορίας (μέσα στην ομάδα της φυλής = 8,000, σ = 0,000, ρ = 0,000. клеткой (рис. 7А). Υπήρχε σημαντική διαφορά στην έκφραση mvHPC Fos μεταξύ ομάδων με καλή εξάλειψη, φτωχή εξάλειψη, ανάκληση φόβου και οικιακά κύτταρα (X2(3) = 8,056, p = 0,045), άρα καλή εξάλειψη (μέση διαφορά κατάταξης = 13,29), p = 0,031), αλλά ούτε στην ομάδα φτωχής εξάλειψης (μέση διαφορά κατάταξης = 6,857, p > 0,999) ούτε στην ομάδα ανάκλησης φόβου (μέση διαφορά κατάταξης = 8.000, p = 0,864) η έκφραση Fos ήταν υψηλότερη από ό,τι στην οικιακή ομάδα.κελί (Εικ. 7Α). mvHPC 中Fos 表达的良好消退、不良消退、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显着差异（X2 (3) = 8.056, p = 0.045），因此良好消退（平均秩差= 13.29） ，p = 0.031 ) 但 无论是 无论是 弱消退 弱消退 弱消退 弱消退 秩差 秩差 回忆 回忆 回忆 比 比 比 比 比 更 多 多 多 多 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 (3) = 8.056, p = 0.045),但 无论是 无论是 弱消退 弱消退 弱消退 弱消退 弱消退 无论是 无论是 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 家庭 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 ς 表达 的 的）))))))))))))) Имелась значительная разница между группами «хорошо», «плохо», «припоминание страха» και «домашняя клетка» для экспрессии Fos в mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045 = 0,045 = σημαδιακή . домашней клетке (рис. 2). Υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ των ομάδων καλών, κακών, ανακλήσεων φόβου και οικιακών κυττάρων για την έκφραση Fos σε mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) και επομένως μια καλή παλινδρόμηση (μέση διαφορά κατάταξης = 13,29), p = 0,031), αλλά ομάδες με ασθενή εξάλειψη (μέση διαφορά κατάταξης = 6,857, p > 0,999) και μνήμες φόβου (μέση διαφορά κατάταξης = 8.000, p = 0,864) έδειξαν υψηλότερη έκφραση Fos από την ομάδα στο κλουβί του σπιτιού (Εικ. 2).7Α).Ωστόσο, δεν υπήρχε σημαντική διαφορά (Χ2(3) = 4,893, p = 0,180) (Εικόνα 7Γ).Επιπλέον, δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της συνολικής έκφρασης Fos σε mvHPC (rs = -0,233, p = 0,309) (Εικόνα 7Β) και της έκφρασης Fos σε κύτταρα προσαγωγών IL mvHPC (rs = 0,056, p = 0,810) (Εικόνα 7D).και αναφορά για την εξαφάνιση.Επιπλέον, δεν υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ της καλής εξαφάνισης, της κακής εξαφάνισης, της ανάκλησης φόβου και των ομάδων οικιακών κυττάρων στην έκφραση Fos σε pvHPC (X2(3) = 3,623, p = 0,353) (Εικόνα 7Ε) και δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές.διαφορά στην καλή παλινδρόμηση της έκφρασης Fos σε κύτταρα προσαγωγών IL pvHPC, φτωχή παλινδρόμηση, μνήμη φόβου και ομάδες οικιακών κυττάρων (Χ2(3)=3,871, p=0,276) (Εικ. 7G).Τέλος, δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της συνολικής έκφρασης του pvHPC Fos (rs = -0,127, p = 0,584) (Εικόνα 7F) και της έκφρασης Fos σε κύτταρα προσαγωγών IL-προσαγωγών pvHPC (rs = 0,176, p = 0,447) και της ανάκλησης εξαφάνισης (Εικόνα 7F ).7Η).
Η έκφραση Fos είναι αυξημένη στον κοιλιακό ιππόκαμπο των αρουραίων, υποδηλώνοντας καλή εξάλειψη της μνήμης.(Α) Η καλά εξαφανισμένη ομάδα, αλλά όχι οι άλλες ομάδες, εμφάνισαν αυξημένη έκφραση του Fos σε mvHPC σε σύγκριση με την ομάδα των εγχώριων κυττάρων.(Β) Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης Fos και της ανάκλησης εξαφάνισης στο mvPHC.(Γ) Η έκφραση Fos σε κύτταρα προσαγωγών IL mvHPC δεν διέφερε σημαντικά μεταξύ των ομάδων.(Δ) Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης Fos σε προσαγωγούς IL και της ανάκλησης εξαφάνισης σε mvHPC.(Ε) Δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές μεταξύ των ομάδων στην έκφραση Fos σε pvHPC.(ΣΤ) Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης Fos και της ανάκλησης εξαφάνισης στο pvHPC.(Ζ) Η έκφραση Fos σε κύτταρα προσαγωγών IL pVHPC δεν διέφερε σημαντικά μεταξύ των ομάδων.(Η) Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης Fos σε προσαγωγούς IL και της ανάκλησης εξαφάνισης σε pvHPC.Οι γραμμές σφάλματος αντιπροσωπεύουν την τυπική απόκλιση του μέσου όρου. *p < 0,05. *p < 0,05. *ρ < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *ρ < 0,05. *p < 0,05.Η κύρια ανάλυσή μας για όλες τις περιοχές έδειξε σύγκριση σε τρία επίπεδα κατά μήκος του προσθιοοπίσθιου άξονα, αν και αναλύσαμε επίσης κάθε περιοχή που κατέρρευσε κατά μήκος του προσθιοοπίσθιου άξονα.Τα αποτελέσματα αυτών των αναλύσεων παρουσιάζονται στον πίνακα 1.
Εδώ δοκιμάσαμε αν οι μεμονωμένες διαφορές στην ανάκληση εξαφάνισης θα αντικατοπτρίζονται σε διαφορετικά μοτίβα προσαγωγικής δραστηριότητας στον κατώτερο μεταιχμιακό φλοιό.Για το σκοπό αυτό, αξιολογήσαμε τη δραστηριότητα του Fos σε προβολές IL από τον παρακοιλιακό θάλαμο, το κλειστό τμήμα, την βασεοπλάγια αμυγδαλή και τον κοιλιακό ιππόκαμπο μετά την επανάληψη της εξαφάνισης.Σε κύτταρα που προβάλλουν IL, βρήκαμε υψηλότερη δραστηριότητα στην οπίσθια περιοχή του PVT σε αρουραίους που εμφάνισαν καλή ανάκληση εξαφάνισης σε σύγκριση με αρουραίους με κακή εξαφάνιση.Δεν υπήρχαν διαφορές στους προσαγωγούς IL από τον πυρήνα της κλείδας, τον κοιλιακό ιππόκαμπο ή την βασεοπλάγια αμυγδαλή.Εκτός από τα κύτταρα που προβάλλουν IL, παρατηρήθηκε αυξημένη νευρική δραστηριότητα σε επιλεγμένες περιοχές της κλειστής μοίρας του αρουραίου και του κοιλιακού ιππόκαμπου με καλή ανάλυση.Τα αποτελέσματά μας υποδεικνύουν ότι η επιτυχής μνήμη εξάλειψης οργανώνεται από συγκεκριμένες προβολές PVT σε κύτταρα IL και μη στόχευσης IL στο claustrum και στον κοιλιακό ιππόκαμπο.
Βρήκαμε ότι η πρόβλεψη PVT IL ήταν ενεργή σε αρουραίους που έδειξαν καλή ανάκληση εξαφάνισης, κάτι που είναι σύμφωνο με μια πρόσφατη μελέτη που δείχνει ότι απαιτείται PVT για την ανάκληση εξαφάνισης.Αυτή η μελέτη δεν χρησιμοποίησε χειρισμούς ειδικούς για την υποπεριοχή, αλλά έδειξε ότι χρειάζονταν τόσο οι προβολές PVT στην πλευρική κεντρική αμυγδαλή όσο και οι προβολές IL στην PVT για την αναπαραγωγή της εξαφάνισης.Τα αποτελέσματά μας υποδεικνύουν ότι, εκτός από την αλυσίδα IL-PVT-CeL, μπορεί επίσης να απαιτείται είσοδος μετά το PVT στο IL για ανάκληση απόσβεσης.Έτσι, αποδεικνύεται ότι τόσο οι απαγωγές όσο και οι προσαγωγές συνδέσεις IL εμπλέκονται στην αναπαραγωγή της εξαφάνισης.Ένα σημαντικό επόμενο βήμα είναι να προσδιοριστεί τι προκαλεί το pPVT να σηματοδοτεί την αναπαραγωγή εξαφάνισης στο επίπεδο του νευρικού κυκλώματος.Εκτός από τη σχέση με το IL, προηγούμενες μελέτες παρακολούθησης αγωγών31,32 έδειξαν ότι το pPVT λαμβάνει είσοδο από το κοιλιακό περιαγωγικό γκρι (vPAG), το οποίο σχετίζεται με τη μάθηση εξαφάνισης33,34,35,36.Αν και ο ρόλος του vPAG στην ανάκληση εξαφάνισης δεν έχει τεκμηριωθεί, η πρόβλεψη του pPVT από το vPAG είναι ελκυστική υποψήφια λόγω της πυκνότητάς τους και της συμμετοχής και των δύο περιοχών στη δημιουργία προηγούμενων ενδείξεων φόβου εξαφάνισης.
Μια άλλη σημαντική πτυχή των αποτελεσμάτων μας PVT είναι ότι είναι εξειδικευμένα κατά μήκος του πρόσθιου-οπίσθιου άξονά τους.Εντυπωσιακά, η νευρωνική δραστηριότητα της προβολής PVT στο IL συσχετίζεται με την αντίθετη κατάσταση συμπεριφοράς, έτσι ώστε η δραστηριότητα προβολής πριν από PVT στην IL σχετίζεται με την ανάκληση φόβου, ενώ η προβολή pPVT είναι ενεργή μετά την επιτυχή εξάλειψη της ανάκλησης (δηλ. φόβο).Αυτή η λειτουργική ετερογένεια εντός του PVT δεν προκαλεί έκπληξη δεδομένης της προηγούμενης εργασίας [που συζητήθηκε στο 37].Ένα εντυπωσιακό παράδειγμα λειτουργικής κατανομής σε PVT εμφανίστηκε πρόσφατα σε μια μελέτη που έχει χαρακτηρίσει τις ιδιότητες συγκεκριμένων τύπων κυττάρων σε PVT.Αυτή η μελέτη δείχνει ότι τα κύτταρα ντοπαμίνης που εκφράζουν DRD2 εκφράζονται κυρίως σε pPVT, νευρώνουν τον φλοιό του πρόσθιου άκρου και ανταποκρίνονται σε αποτρεπτικά ερεθίσματα.Ο δεύτερος κυτταρικός πληθυσμός εκφράζεται κυρίως σε aPVT και σηματοδοτεί τη μετάβαση σε μια κατάσταση χαμηλής φυσιολογικής διέγερσης και νευρώνει τον φλοιό των κάτω άκρων.Τα αποτελέσματά μας δύσκολα ταιριάζουν σε αυτό το μοτίβο, καθώς τα κύτταρα aPVT που προβάλλουν IL είναι ενεργά κατά την ανάκληση του φόβου, ενώ οι προβολές pPVT είναι ενεργές και τα ζώα δείχνουν χαμηλά επίπεδα φόβου.Υπάρχουν τουλάχιστον δύο πιθανές εξηγήσεις για την προφανή ασυμφωνία.Πρώτον, οι αναγνωρισμένοι τύποι κυττάρων δεν εντοπίζονται αποκλειστικά σε μία πρόσθια-οπίσθια θέση του TVV.Έτσι, τα ενεργά κύτταρα pPVT που προβάλλουν IL σε αρουραίους με καλή μνήμη εξαφάνισης μπορεί να ανήκουν σε μια κατηγορία κυττάρων που είναι πιο πιθανό να ανιχνευθούν στο aPVT και να σηματοδοτούν μια μετάβαση σε μια κατάσταση χαμηλής διέγερσης.Το ίδιο μπορεί να ισχύει για κύτταρα που προβάλλουν IL σε aPVT που ενεργοποιείται μετά από μνήμη φόβου.Δεύτερον, προηγούμενες μελέτες ιχνηλάτησης έχουν εντοπίσει την παρουσία pPVT που προβάλλουν IL3, αν και μερικά φαίνεται να προέρχονται από κύτταρα που περιέχουν DRD2, άλλοι τύποι κυττάρων μπορεί να προβάλλουν στην IL και να ενεργοποιούνται μετά την επιτυχή αναπαραγωγή της απόσβεσης.
Αν και ο στόχος αυτής της μελέτης ήταν να εντοπίσει διαφορές μεταξύ των αρουραίων που παρουσίαζαν διαφορετικούς φαινοτύπους εξαφάνισης, αυτά τα πειράματα αποκάλυψαν επίσης νέα δεδομένα που σχετίζονται με τους μηχανισμούς μνήμης φόβου.Είναι ενδιαφέρον ότι βρήκαμε αυξημένη δραστηριότητα Fos στο πρόσθιο CLA σε αρουραίους με μνήμη φόβου.
Η κλείδα τοποθετείται ως το κέντρο της επικοινωνίας του φλοιού και εμπλέκεται σε διαδικασίες που κυμαίνονται από την αισθητηριακή ολοκλήρωση έως την προσοχή και τον ύπνο40,41,42,43.Υπάρχουν περιορισμένα στοιχεία σχετικά με το πώς το claustrum εμπλέκεται στη ρύθμιση του φόβου ή στην έκφραση φόβου, ωστόσο, παλαιότερη έρευνα έχει δείξει ότι η έκφραση φόβου με βάση τα συμφραζόμενα εμπλέκεται στη δραστηριότητα του Fos στο claustrum.Έχει αναφερθεί πρόσφατα ότι η αναστολή των προβολών ατρησίας στον ενδορινικό φλοιό κατά τη διάρκεια της προετοιμασίας του φόβου με βάση τα συμφραζόμενα βλάπτει το σχηματισμό μακροπρόθεσμης μνήμης, αν και η ανάγκη τους για έκφραση φόβου δεν έχει δοκιμαστεί.Στην ίδια μελέτη, αυξημένη ενεργοποίηση του Fos παρατηρήθηκε όταν τα ζώα εκτέθηκαν σε νέο περιβάλλον σε σύγκριση με ποντίκια που εκτέθηκαν σε ένα οικείο περιβάλλον.Έχοντας αυτό υπόψη, η ενεργοποίηση του CLA που αναφέρουμε εδώ μπορεί να οφείλεται στην έκθεση στη νέα κάμερα κατά τη διάρκεια της δοκιμής και όχι στον φόβο της ίδιας της ανάκλησης.Για να χαρακτηριστεί με μεγαλύτερη ακρίβεια η λειτουργία των κλειδαριών στην επεξεργασία του φόβου και της κατάστασης, μελλοντικές μελέτες θα πρέπει να χρησιμοποιούν στοχευμένο χειρισμό κλειδαριάς.
Αν και προηγούμενες εργασίες έχουν δείξει ότι η PVT σχετίζεται με την έκφραση της μνήμης φόβου,45,46,47 δεν παρατηρήσαμε καμία αλλαγή στη συνολική έκφραση Fos σε αρουραίους όταν ανακαλούσαν τον φόβο 48 ώρες μετά την προετοιμασία.Αυτή η διαφορά μπορεί να εξηγηθεί από διάφορους παράγοντες, συμπεριλαμβανομένου του φόβου προηγούμενων δοκιμών εργασίας για διακριτές ενδείξεις στο ίδιο πλαίσιο στο οποίο έλαβε χώρα η προετοιμασία, ενώ στο πείραμά μας, η δοκιμή έγινε σε νέο δωμάτιο.Επιπλέον, κάναμε ευθανασία στα ζώα μας 60 λεπτά μετά τη δοκιμή, ενώ η προηγούμενη εργασία χρησιμοποιούσε ένα χρονικό σημείο 90 λεπτών.Τέλος, σε προηγούμενες μελέτες, το τεστ διεξήχθη σε ένα δωμάτιο όπου τα ζώα μπορούσαν να ανταποκριθούν με όρεξη, ενώ στην εργασία μας, οι αρουραίοι ελέγχθηκαν χωρίς απόκριση όρεξης.Ενώ αυτό επιτρέπει κάποιο βαθμό εξαρτημένης αναστολής, υπάρχουν ενδείξεις ότι το να επιτρέπεται στα ζώα να αναστέλλουν την πίεση για να λάβουν τροφή ενώ δοκιμάζουν εάν φοβούνται τα συνθήματα δημιουργεί κινητήρια σύγκρουση (δηλαδή, φόβος έναντι ανταμοιβής), που είναι βασικός διεγερτικός παράγοντας.συμμετοχή PVT48, 49. .
Η βασεοπλάγια αμυγδαλή είναι γνωστό ότι εμπλέκεται στην απόκτηση της εξαφάνισης του φόβου50,51 και υπάρχουν ενδείξεις ότι οι προβολές BLA στην IL εμπλέκονται επίσης σε αυτή τη διαδικασία23.Ωστόσο, δεν είναι σαφές εάν το BLA και οι διασυνδέσεις του εμπλέκονται στην επιστροφή της εξαφάνισης.Μελέτες απεικόνισης23,28 έχουν δείξει αυξημένη δραστηριότητα BLA σε ζώα που ανακαλούν ξεθωριασμένες αναμνήσεις.Ενώ η προηγούμενη εργασία μας δεν έδειξε διαφορά στην ενεργοποίηση BLA μεταξύ καλών και κακών αρουραίων εξαφάνισης, τα αποτελέσματά μας εδώ υποδηλώνουν ότι η ανάκληση εξαφάνισης γενικά δεν επηρεάζει το BLA ή την ενεργοποίηση στην πρόβλεψη της BLA IL.Σύμφωνα με τα ευρήματά μας, αν και οι μελέτες χειρισμού κυκλωμάτων υποδηλώνουν ότι οι είσοδοι IL στο BLA είναι σημαντικές για την εκμάθηση εξαφάνισης, δεν είναι απαραίτητες για την ανάκληση εξαφάνισης.Ωστόσο, ο ρόλος του BLA δεν μπορεί να αγνοηθεί εντελώς, καθώς πρόσφατα στοιχεία υποδηλώνουν ότι ορισμένοι τύποι κυττάρων στο BLA απαιτούνται για την αναπαραγωγή της εξαφάνισης.
Σημειωτέον, η ανάκληση του φόβου δεν οδήγησε σε ενεργοποίηση του Fos στο BLA, καθώς προηγούμενες μελέτες αλλοιώσεων, φαρμάκων και απεικόνισης έχουν εμπλακεί σε αυτήν την περιοχή στην έκφραση φόβου ή/και στην επανασυγκράτηση του φόβου μετά την ανάκτηση54,55,56,57.Τα δεδομένα που παρουσιάζονται εδώ συνδυάζουν τον βασικό και τον πλάγιο υποπυρήνα της αμυγδαλής και τα προηγούμενα δεδομένα υποδηλώνουν ότι η έκφραση φόβου οδηγεί τη δραστηριότητα του Fos στη ραχιαία πλευρά του πλευρικού πυρήνα.Αναλύσαμε τα υποκείμενα και τα πλευρικά δεδομένα ξεχωριστά, αλλά δεν υπήρχε διαφορά σε καμία από τις δύο περιπτώσεις (τα δεδομένα δεν εμφανίζονται) και οι δύο περιοχές κατέρρευσαν στα δεδομένα που παρουσιάζουμε εδώ.Δεν αναλύσαμε υποπεριοχές της πλάγιας αμυγδαλής, επομένως συγκεκριμένες αλλαγές σε αυτήν την περιοχή μπορεί να καλυφθούν.Μια άλλη πιθανότητα να μην υπάρχει αλλαγή στη δραστηριότητα του Fos στο BLA οφείλεται στον χρονισμό των αναμνήσεων φόβου σε σύγκριση με την προετοιμασία.Κάποια προηγούμενη εργασία έχει δείξει ότι η συμβολή του BLA στην έκφραση φόβου μειώνεται με το χρόνο μετά την προετοιμασία, έτσι ώστε η έκφραση να εξαρτάται από το BLA 24 ώρες μετά την προετοιμασία αλλά ανεξάρτητη στις 7 ημέρες (αναφ. 45 αλλά βλέπε 58).συνέβη 48 ώρες μετά την προπόνηση, καθιστώντας την έλλειψη αλλαγής στη δραστηριότητα του Fos σε αυτό το χρονικό σημείο πιθανότατα να αντανακλά τις χρονικά εξαρτώμενες αλλαγές στη συμμετοχή BLA στην έκφραση φόβου.
Τέλος, βρίσκουμε στοιχεία ότι η επιτυχής μνήμη εξαφάνισης σχετίζεται με τον κοιλιακό ιππόκαμπο.Αυτό είναι χαρακτηριστικό των «ενδιάμεσων» vHPC καθώς το ίδιο μοτίβο δεν παρατηρήθηκε στην οπίσθια περιοχή.Σε συμφωνία με την προηγούμενη εργασία, δεν βρήκαμε καμία αλλαγή στην ενεργοποίηση Fos σε προσαγωγές vHPC IL.Υπάρχουν ουσιαστικές ενδείξεις ότι το vHPC28,60,61 απαιτείται για την πραγματοποίηση του φόβου όταν το CS συμβαίνει εκτός του πλαισίου στο οποίο εμφανίζεται το ξεθώριασμα και ότι αυτό εξαρτάται τουλάχιστον εν μέρει από την είσοδο του vHPC στην IL13.Με βάση αυτά τα προηγούμενα αποτελέσματα, θα περιμέναμε ότι η κακή εξασθένιση θα σχετίζεται με αυξημένη προβλεπόμενη δραστηριότητα IL του vHPC.Ωστόσο, αυτό δεν συνέβη, καθώς δεν υπήρχε διαφορά στη δραστηριότητα του Fos σε παλίνδρομα επισημασμένα με IL vHPCs ή μη επισημασμένα κύτταρα σε vHPCs.Αυτό υποδηλώνει ότι η αδυναμία να θυμηθούμε το ξεθώριασμα στο πλαίσιο του ξεθώριασμα μπορεί να ενεργοποιήσει έναν διαφορετικό μηχανισμό από τον φόβο της ανανέωσης.
Είναι σημαντικό να σημειώσουμε ορισμένους από τους εγγενείς περιορισμούς σχεδιασμού και ανάλυσης και πώς επηρεάζουν τα συμπεράσματά μας.Αρχικά, χωρίσαμε τα ζώα σε ανώτερα και κάτω τρίτα και τα ποντίκια σε «καλά» και «κακά» με βάση τις βαθμολογίες ανάκλησης εξαφάνισης.Αυτό γίνεται για να αποφευχθούν ομαδικά σχήματα που χωρίζουν τα ζώα σε ξεχωριστές ομάδες από τη μέση της κατανομής ή σχήματα ομάδων που αποκλείουν ζώα από το μέσο της κατανομής, όπως διαχωρισμός με διάμεσο ή σύγκριση του ανώτερου και του κατώτερου τρίτων των αρουραίων .Θέλουμε να αποφύγουμε αυτήν την κατάσταση επειδή η διάμεση διαίρεση δεν αντικατοπτρίζει τη μεταβλητότητα των ανθρώπινων αντιδράσεων στο τραύμα που προσπαθούμε να μοντελοποιήσουμε.Επιπλέον, ενώ η σύγκριση του ανώτερου και του κατώτερου τρίτων των αρουραίων μας επιτρέπει να συγκρίνουμε ομάδες παρόμοιου μεγέθους, αυτή η προσέγγιση αγνοεί τα ζώα στο κέντρο της κατανομής και δεν αντικατοπτρίζει με ακρίβεια τη μεταβλητότητα στις αντιδράσεις σε τραυματισμό.Ενώ η μέθοδός μας μπορεί να υποφέρει από προβλήματα με ετερογενή διακύμανση και σύγκριση ομάδων με άνισα μεγέθη δείγματος, καταγράφει αυτό που προσπαθούμε να μιμηθεί καλύτερα από τις εναλλακτικές μεθόδους.
Τα αποτελέσματα που παρουσιάζονται εδώ μας βοηθούν να κατανοήσουμε καλύτερα πώς οι μεμονωμένες διαφορές στην ανάκληση εξαφάνισης αντικατοπτρίζονται στις διαφορές στη δραστηριότητα του νευρικού κυκλώματος.Τα ευρήματά μας μπορεί να σχετίζονται με τη διαταραχή μετατραυματικού στρες, η οποία είναι γνωστό ότι σχετίζεται με υπερβολικό φόβο και αδυναμία εξάλειψης των απαντήσεων φόβου.Δείχνουμε ότι οι διαφορές στην ανάκληση εξαφάνισης σχετίζονται με διαφορές στην εγγενή και την εξωγενή νευρική δραστηριότητα που προβάλλεται στο IL.Αυτές οι διαφορές κατανεμήθηκαν σε διακριτές περιοχές κατά μήκος του προσθιοοπίσθιου άξονα, υπογραμμίζοντας περαιτέρω τη σημασία της αξιολόγησης της λειτουργίας του εγκεφάλου σε υποπεριφερειακό επίπεδο.Τα μειονεκτήματα της τρέχουσας μεθόδου περιλαμβάνουν τη συνάφεια της μελέτης και την εστίαση στα αρσενικά τρωκτικά.Η μελλοντική έρευνα θα πρέπει να καθορίσει τους νευροβιολογικούς μηχανισμούς που διέπουν τη μάθηση της εξαφάνισης στα θηλυκά τρωκτικά και να χρησιμοποιήσει μεθόδους για την εξαγωγή αιτιακών συμπερασμάτων.
Τα σύνολα δεδομένων που χρησιμοποιούνται ή/και αναλύονται στην τρέχουσα μελέτη είναι διαθέσιμα από τους αντίστοιχους συγγραφείς κατόπιν εύλογου αιτήματος.
Pavlov IP Conditioning: μια μελέτη της φυσιολογικής δραστηριότητας του εγκεφαλικού φλοιού.(Oxford University Press, 1927).
Rothbaum, BO, & Davis, M. Εφαρμογή αρχών μάθησης στη θεραπεία μετατραυματικών αντιδράσεων. Rothbaum, BO, & Davis, M. Εφαρμογή αρχών μάθησης στη θεραπεία μετατραυματικών αντιδράσεων.Rotbaum BO and Davis M. Εφαρμογή αρχών μάθησης στη θεραπεία μετατραυματικών αντιδράσεων.Rotbaum BO and Davis M. Εφαρμογή αρχών μάθησης στη θεραπεία μετατραυματικών αντιδράσεων.εγκαθιστώ.New York College.η επιστήμη.1008(1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Review of exposure therapy: a gold standard for PTSD treatment. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Review of exposure therapy: a gold standard for PTSD treatment.Rauch SA, Eftekhari A. and Ruzek DI Μια ανασκόπηση της θεραπείας έκθεσης: η χρυσή πρότυπη θεραπεία για τη διαταραχή μετατραυματικού στρες. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI 暴露疗法回顾：PTSD 治疗的黄金标准。 Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Review of exposure therapy: The gold standard for PTSD treatment.Rauch, SA, Eftekhari, A. and Ruzek, DI Μια ανασκόπηση της θεραπείας έκθεσης: η χρυσή τυπική θεραπεία για τη διαταραχή μετατραυματικού στρες.J. Αποκατάσταση.Reservoir development 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
Foa, EB Θεραπεία μακράς έκθεσης: παρελθόν, παρόν και μέλλον.Repression of Anxiety 28, 1043–1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
Ο κ. Millard et al.Υπαρξιακές και επίκτητες αιτίες απώλειας μνήμης στη διαταραχή μετατραυματικού στρες: ευρήματα από μια δίδυμη μελέτη.J. Ψυχίατρος.δεξαμενή αποθήκευσης.42(7), 515-520 (2008).
Ο κ. Millard et al.Η νευροβιολογική βάση της αδυναμίας ανάκλησης αναμνήσεων που ξεθωριάζουν στη διαταραχή μετατραυματικού στρες.βιολογία.Ψυχολογία.66(12), 1075-1082 (2009).
Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Ατομικές διαφορές στο φόβο: Απομόνωση της αντιδραστικότητας του φόβου και των φαινοτύπων ανάκτησης φόβου. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Ατομικές διαφορές στο φόβο: Απομόνωση της αντιδραστικότητας του φόβου και των φαινοτύπων ανάκτησης φόβου.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. and LeDoux, JE Ατομικές διαφορές στο φόβο: διάκριση φαινοτύπων αντίδρασης φόβου και αποκατάστασης φόβου. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE 恐惧的个体差异：隔离恐惧反应和恐惧恢复表型。 Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Ατομικές διαφορές στο φόβο: απομόνωση απόκρισης φόβου και πίνακας ανάκτησης φόβου.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. and LeDoux, JE Ατομικές διαφορές στον φόβο: η απομόνωση των αντιδράσεων του φόβου και ο φαινότυπος της ανάκτησης του φόβου.J. Trauma.πίεση 20(4), 413–422 (2007).
Russo, AS & Parsons, RG Η ακουστική απόκριση ξαφνιάσματος σε αρουραίους προβλέπει τη διακύμανση μεταξύ των ατόμων στην εξαφάνιση του φόβου. Russo, AS & Parsons, RG Η ακουστική απόκριση ξαφνιάσματος σε αρουραίους προβλέπει τη διακύμανση μεταξύ των ατόμων στην εξαφάνιση του φόβου.Οι Russo, AS και Parsons, RG Η ακουστική απόκριση ξαφνιάσματος σε αρουραίους προβλέπει μεμονωμένες διαφορές στην εξαφάνιση του φόβου. Russo, AS & Parsons, RG 大鼠的声学惊吓反应预测恐惧消退的个体差异。 Russo, AS & Parsons, RGΟι Russo, AS και Parsons, RG Η ακουστική απόκριση ξαφνιάσματος σε αρουραίους προβλέπει μεμονωμένες διαφορές στην εξαφάνιση του φόβου.Νευροβιολογία.μελέτη.Μνήμη.139, 157–164 (2017).
Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Η ατομική μεταβλητότητα στην ανάκληση της εξάλειψης του φόβου σχετίζεται με τη φωσφορυλίωση της ενεργοποιημένης από μιτογόνο πρωτεϊνικής κινάσης στον υπομελιθικό φλοιό. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Η ατομική μεταβλητότητα στην ανάκληση της εξάλειψης του φόβου σχετίζεται με τη φωσφορυλίωση της ενεργοποιημένης από μιτογόνο πρωτεϊνικής κινάσης στον υπομελιθικό φλοιό.Russo, AS, Lee, J. and Parsons, RG Η ατομική μεταβλητότητα στην εξαφάνιση της ανάκλησης του φόβου σχετίζεται με τη φωσφορυλίωση της κινάσης πρωτεΐνης που ενεργοποιείται από μιτογόνο στον υπομελιθικό φλοιό. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG 回忆恐惧消退的个体差异与边缘下皮质中丝裂原活化蛋白 Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Η ανάμνηση της εξασθένισης του φόβου σχετίζεται με μεμονωμένες διαφορές στην περιφερειακή 美裯中丝裂原活化筒能激酶的φωσφοροποίηση.Russo, AS, Lee, J. and Parsons, RG Οι ατομικές διαφορές στην εξάλειψη του φόβου κατά την ανάκληση σχετίζονται με τη φωσφορυλίωση των πρωτεϊνικών κινασών που ενεργοποιούνται από το μιτογόνο στον φλοιό των κάτω άκρων.Psychopharmacology 236(7), 2039–2048 (2019).